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C57/BL6 小鼠中的竞争性骨髓移植实验简述

2020.4.15

造血干细胞 (HSC) 能够分化形成血液系统的全部细胞,是维持血液系统所必需的细胞。造血干细胞是一种多能干细胞,具有自我更新的能力,并能够通过层次过程生成各种血细胞系统的中期细胞,从而再生成机体血细胞。

为研究干细胞龛,研究人员必须能够确定在受控条件下细胞群生成成体细胞系统的能力。实验中采用的典型策略是将富含 HSC 的骨髓移植到受体小鼠血液系统之中,而受体小鼠的血液系统经亚致死剂量照射后人为清除。在这些小鼠中,成体血细胞以及干细胞、前体细胞均将在 照射 2 周后死亡。经过移植的细胞可以分化新的血液系统,从而解救小鼠。HSC 可基于其短期 (ST- HSC)、长期 (LT-HSC) 以及中期 (IT- HSC) 重建能力实现再次分裂 。在大多数报告中,研究人员确定 LT-HSC 的方式是:在移植术后 16-44 周的不同时间点,对其生成循环单核细胞、粒细胞和淋巴细胞的能力进行测定。对移植后细胞进行的第一次竞争性分析应在移植术后 4-6 周予以完成。

在移植研究中,通常采用野生型近交 C57/BL6 小鼠,但前提是:这些小鼠携带Ptprcb 白细胞标记(CD45.2/Ly5.2) 等位基因。Sloan Kettering 研究所 通过回交 SJL 小鼠与野生型 C57/BL6 小鼠的方式,培养出了一种被称为 C57BL/6-Ly5.1 的同类品系小鼠。这些小鼠携带 Ptprcb 白细胞标记 (CD45.1/Ly5.1) 等位基因。使用常用的抗 CD45.1 和 CD45.2抗体,研究人员可以轻松鉴定宿主和移植细胞,并确定 HSC 在竞争性实验中发挥的作用。

在本文中,我们概括性地描述了一项简单的实验,这项实验的具体内容是:对经照射小鼠进行移植后,对其外周血中Cd45.2- 供体与 CD45.1- 宿主白细胞进行测定。

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