发酵过程中染菌综合分析及防止措施（一）
造成发酵染菌的可能途径有哪些？
菌种培养过程操作不当
培养基灭菌不彻底
发酵设备（如发酵罐、管道）密封不严
空气除菌不净
2.既然染菌不可避免，哪我们应该怎样做？
要提高生产技术水平，强化生产过程的管理，把握好各个易染菌的环节，尽可能防止发酵染菌的发生；而且一旦发生染菌，要能尽快找出其污染的原因，并采取相应的有效措施，把发酵染菌造成的损失降低到最小。
3.不同发酵过程相对危害最大的杂菌种类？
青霉素的发酵 细短产气杆菌
链霉素的发酵 细短杆菌、假单孢杆菌
四环素的发酵 双球菌、芽孢杆菌、荚膜杆菌
谷氨酸的发酵 噬菌体
柠檬酸的发酵 青霉菌
4.不同生产阶段染菌对发酵的影响：
种子培养期染菌:对整个发酵过程的危害极大
发酵前期染菌：严重干扰生产菌的生长繁殖
发酵中期染菌：干扰生产菌的代谢，影响产物的生成
发酵后期染菌：影响相对较小
5.不同染菌原因对发酵的影响：
种子带菌：将导致染菌范围不断扩大，使生产蒙受重大损失。
空气带菌：使发酵大面积染菌
培养基或设备灭菌不彻底：一般不具延续性，使单个（批）发酵罐发酵失败
设备渗漏：染菌几率较大
6.发酵异常现象及染菌原因分析：
（1）溶解氧的异常变化
当杂菌是好气性微生物时，溶解氧的变化是在较短时间内下降，直至接近于零，且在
长时间内不能回升；
当杂菌是非好气性微生物，而生产菌由于受污染而抑制生长，使耗氧量减少，溶解氧升高。
（2）排气的CO2异常变化
如杂菌污染时，糖耗加快， CO2含量增加，噬菌体污染后，糖耗减慢，CO2含量减少。因此，可根据CO2含量的异常变化判断染菌。
（3）其它异常现象：
如菌体生长不良、pH值的异常变化、发酵过程中泡沫的异常增多、发酵液的颜色异常变化、代谢产物含量的异常下跌、发酵周期的异常拖长、发酵液的粘度异常增加等判断染菌。
7.染菌原因分析：
（1）从染菌的规模来分析染菌原因
大批发酵罐染菌：空气系统
部分发酵罐(或罐组)染菌：前期可能是种子带杂菌，或灭菌不彻底，中后期则可能是中间补料系统或由管路系统发生问题所造成的
个别发酵罐连续染菌：设备问题(如阀门的渗漏或罐体腐蚀磨损)，设备的腐蚀磨损所引起的染菌会出现每批发酵的染菌时间向前推移的现象
个别发酵罐偶然染菌：原因比较复杂，因为各种染菌途径都可能引起。
（2）从染菌的时间来分析
发酵早期染菌：种子带菌、培养基和设备灭菌不彻底、设备或管道有死角中、后期染菌：中间补料、设备渗漏、操作不合理
（3）从染菌的类型来分析：
耐热性芽孢杆菌：死角或灭菌不彻底
球菌、酵母：可能是从蒸汽的冷凝水或空气中带来的浅绿色菌落(革兰氏阴性杆菌) ：发酵罐的冷却管或夹套渗漏霉菌：灭菌不彻底或无菌操作不严格
（4）设备渗漏的原因：当设备渗漏时，往往每批染菌发生的时间逐渐提前
a发酵液中腐蚀性物质对设备的腐蚀
b磨蚀
c设备加工不良
（5）盘管渗漏的防止：
放罐后要认真清洗发酵罐
控制冷却水质量，降低其中氯离子含量
对盘管定期检查、试漏，及时发现漏隙
试漏方法：气压试验 水压试验
空气分布管渗漏的防止
罐体渗漏的防止
管件的渗漏
管路的连接：
螺纹连接 法兰连接 焊接
（6）空气过滤系统方面原因：
原因分析：进风口、生产环境、空气过滤器
染菌特点：空气过滤系统带菌会使发酵罐批批染菌、罐罐染菌，此时就要对空气过滤系统进行无菌样检测
8.染菌的检查和判断
①无菌试验方法
②显微镜检查法（镜检法）
③肉汤培养法
④平板划线培养或斜面培养检查法
发酵过程的异常现象观察法
如果肉汤连续三次发生变色反应（由红色变为黄色）或产生混浊，或平板培养连续三次发现有异常菌落的出现，即可判断为染菌。
9.杂菌污染的挽救及处理：
（1）种子培养期染菌：应经灭菌后弃之，并对种子罐、管道等进行仔细检查和彻底灭菌
（2）发酵前期染菌：营养成分消耗不多，应迅速重新灭菌；另处，补充必要的营养成分，重新接种进行发酵。
（3）发酵中、后期染菌：可以加人适当的杀菌剂或抗生素以及正常的发酵液，以抑制杂菌的生长速度；产品的含量若达一定值，只要明确是染菌也可放罐。
（4）发酵后对设备的处理：空罐加热灭菌后至120℃以上、30min后，才能使用。也可用甲醛熏蒸或甲醛溶液浸泡12h以上等方法进行处理
