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溶血反应(hemolytic reaction)与补体结合试验(2)

2020.9.14

凡最高稀释度的溶血素可呈现完全溶血者为一个单位。依上表结果第10管(即1:4000倍稀释)0.5毫升溶血素为一个单位,在溶血反应中常用 0.5毫升中含有2个溶血素单位的溶液,所以试验时应取1:2000倍稀释的溶液。

 

(2)补体单位滴定

依下表加入各试剂:

 

管号 1:20补体(ml) 抗原(ml) 生理盐水(ml)

37

45

溶血素(2单位)(ml) 20%羊血球悬液

37

15

结果
1 0.20 0.5 1.30 0.5 0.5 不溶血

2 0.25 0.5 1.25 0.5 0.5 稍溶血

3 0.30 0.5 1.20 0.5 0.5 全溶血

4 0.35 0.5 1.15 0.5 0.5 全溶血

5 0.40 0.5 1.10 0.5 0.5 全溶血

6 0.45 0.5 1.05 0.5 0.5 全溶血

7 0.50 0.5 1.00 0.5 0.5 全溶血

8 —— 0.5 1.50 0.5 0.5 不溶血

  能引起完全溶血的最小补体量称为准确单位,上表中第3管(即0.3毫升),但因补体的部分损失,故普通稍高的一管为实用单位,实际试验时用两个实用单位。

上表结果为:补体标准单位:0.3毫升;补体实用单位:0.35毫升;补体两个实用单位:0.70毫升。因试验时时两个实用单位的补体0.5毫升,可依下列比例关系换算:20:0.7=x:0.5,得x=14.3,即需将补体稀释14.3倍,用0.5毫升则含有两个实用单位。

(3)抗原的滴定

在用已知抗原测定未知抗体时,必须先滴定抗原效价以决定本试验时所需抗原的最适浓度(反之用已知抗体测定未知抗原时,则需滴定抗体效价)

试剂 \ 管号 1 2 3 4 5 6
1:5 稀释血清 0.5 0.5 0.5 —— —— ——
伤寒抗原2U 0.5 —— —— 0.5 —— ——
痢疾抗原1:80 —— 0.5 —— —— —— ——
补体 2U 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
生理盐水 —— —— 0.5 0.5 1.0 1.5
摇匀放置37℃水浴中30min





溶血素 2U 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 ——
2%羊血球 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
摇匀放置37℃水浴中15min





说明 试验管 特异性对照 血清对照 抗原对照 溶血素对照 羊血球对照

如血清对照管呈完全或部分不溶血是为抗补体现象。血清严重污染细菌,混有淋巴液或显著溶血时,常产生很强抗外体作用。又如试管、 吸管不清洁,也可出现抗补体。若有抗补体发生,应抽血重试验。


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