灰黄霉素的检查方法
酸度取本品0.25g,加乙醇20ml,振摇,立即加酚酞指示液0.1ml并用氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)滴定至显微红色,消耗氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)不得过1.0ml溶液的澄清度与颜色取本品5份,各0.75g,分别加N,N-二甲基甲酰胺10ml溶解后,溶液应澄清无色;如显浑浊,与1号浊度标准液(通则0902第一法)比较,均不得更浓;如显色,与黄色3号标准比色液(通则0901第一法)比较,均不得更深。粒度精密称取本品10mg,加水2~4滴,使均匀湿润,加玻璃珠20粒,振摇3~5分钟后,加5%阿拉伯胶溶液10ml,充分振摇10分钟,立即用滴管自底部吸取供试液,迅速用滤纸拭净滴管外部,垂直滴1滴于血球计数板上,盖上盖玻片,置显微镜下检视,计数,含5m及5m以下的颗粒应不少于85%,含50μm及50μm以上的颗粒数,全视野检视,不得超过5颗。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液取本品适量,加流动相A溶解并稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液。对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置100ml量瓶中,用流动相A稀释至刻度,摇匀。灵敏度溶液精密量取对照溶液适量,用流动相A定量稀释制成每1ml中约含0.25μg的溶液。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm×250mm,5m或效能相当的色谱柱);以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液乙腈-甲醇(57:38:5)(用磷酸调节pH值至3.7士0.2)为流动相A,以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液腈-甲醇(28:68:8)(用磷酸调节pH值至3.7±0.2)为流动相B;先以流动相A等度洗脱,待灰黄霉素洗脱完毕后立即按下表进行线性梯度洗脱;检测波长为254nm;进样体积10pl时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)100100100系统适用性要求灵敏度溶液色谱图中,主成分色谱峰峰高的信噪比应大于10。测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,去氯灰黄霉素(相对保留时间约为0.⑦)峰面积不得大于对照溶液主峰面积的2.5倍(2.5%),去氢灰黄霉素(相对保留时间约为1.1)峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.75倍(0.75%),其他各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积(1.0%),小于灵敏度溶液主峰面积的峰忽略不计。干燥失重取本品,在105℃千燥至恒重,减失重量不得过0.5%(通则0831)。 炽灼残渣取本品1.0g,依法检查(通则0841),遗留残渣不得过0.2%重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣,依法检查(通则0821第二法),含重金属不得过百万分之二十五。
