药品中一般杂质检查项目与方法介绍（三）
一、一般杂质的检查项目
一般杂质的检查项目有氯化物、硫酸盐、铁盐、砷盐、重金属、酸碱度、硫化物检查法、硒盐、炽灼残渣、干燥失重、水分、溶液颜色、易炭化物、溶液澄清度等。一般杂质的检查方法在药典附录中加以规定,药品正文中各药品的质量标准检测,可直接从附录中引用,在日常检测中,注意平行的原则,注意所用仪器、器皿的对称性及供试品与对照品的平行操作。
1.氯化物检查法
氯化物广泛存在于自然界,在生产过程中常用到盐酸、盐酸盐等试剂,因此氯化物极易引入到药物中。氯化物对人体无害,但氯化物检查结果可以显示药品的纯度,间接考核药物的生产、贮藏过程是否正常,因此氯化物常作为信号杂质检查。
(1)原理
药物中的微量氯化物在硝酸酸化条件下与硝酸银反应,生成氯化银胶体微粒而显白色混浊,与一定量的标准氯化钠溶液在相同条件下产生的氯化银混浊程度比较,判断供试品中氯化物是否符合限量规定。
(2)操作方法
除另有规定外,取各药品项下规定量的供试品,加水溶解使成25ml(溶液如显碱性,可滴加硝酸使成中性),再加稀硝酸10ml;溶液如不澄清,应滤过;置50ml纳氏比色管中,加水使成约40ml,摇匀,即得供试液。另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液,置50ml纳比色管中,加稀硝酸10ml,加水使成40ml,摇匀,即得对照溶液。于供试溶液与对照溶液中,分别加入硝酸银试液1.0ml,用水稀释至50ml,摇匀,在暗处放置5min,同置黑色背景上,从比色管上方向下观察,比较,即得。
(3)测定条件
①标准氯化钠溶液的制备 称取氯化钠0.165g,置于1000ml量瓶中,加水溶解稀释至刻度,摇匀,作为贮备液。临用前,精密量取该溶液10ml,于100ml量瓶中定容(每1ml相当于10μg的Cl)。
②测定条件下,氯化物浓度以50ml中含0～80μg的Cl为宜,相当于标准氯化钠溶液5～8ml。此范围内氯化物所显混浊度明显,便于比较。应以此计算供试品取样量范围。
③加硝酸可避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银及氧化银沉淀的干扰,且可加速氯化银沉淀的生成并产生较好的乳浊。酸度以50ml供试溶液中含稀硝酸10ml为宜。
④供试品溶液如不澄明,应过滤,应先用含硝酸的蒸馏水洗净滤纸中的氯化物。
⑤供试品如带颜色,常采用内消色法处理,即取供试品溶液两份,分置50ml纳氏比色管中,一份加硝酸银试液1.0ml,摇匀,放置10min,如显混浊,可反复过滤,至滤液完全澄清,再加规定量的标准氯化钠溶液与水适量使成50ml,摇匀,在暗处放置5min,作为对照溶液;另一份加硝酸银试液1.0ml与水适量使成50ml,摇匀,在暗处放置5min,对两管进行比浊。
⑥操作时的温度一般控制在30～40℃,以产生最大的混浊度,结果也较恒定;若在20℃以下,生成氯化银混浊的速度较慢,也不恒定。
⑦检查氯化物时,应按规定操作程序进行,先制成约40ml水溶液后,再加硝酸银试液,以免有较高浓度的氯化物存在时产生沉淀,影响比浊结果。加入硝酸银试液后,宜缓慢地混匀,如过快则生成的混浊减少。另外,标准管与供试管必须平行进行实验,如加入试剂的程序及放置时间应一致,所用纳氏比色管的规格应一致,比浊时同置于黑色衬底上自上而下观察。
2.硫酸盐检查法
硫酸盐是广泛存在于自然界的信号杂质,许多药物都要检查硫酸盐杂质。
(1)原理
硫酸盐在稀盐酸酸性条件下与氯化钡反应,生成硫酸钡微粒显白色混浊,与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件下产生的硫酸钡混浊程度比较,判定供试品硫酸盐是否符合限量规定。
(2)操作方法
除另有规定外,取各药品项下规定量的供试品,加水溶解使成约40ml(溶液如显碱性,可滴加盐酸使成中性);溶液如不澄清,应滤过;置50ml纳氏比色管中,加稀盐酸2ml,摇匀,即得供试液。另取各药品项下规定量的标准硫酸钾溶液,置50ml纳氏比色管中,加水使成约40ml,加稀盐酸2ml,摇匀,即得对照溶液。于供试溶液与对照溶液中,分别加入25%氯化钡溶液5ml,用水稀释成50ml,充分摇匀,放置10min,同置黑色背景上,从比色管上方向下观察,比较,即得。
(3)测定条件
①标准硫酸钾溶液的制备 称取硫酸钾0.181g,置于1000ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得。
②在测定条件下,50ml溶液中含100～500μg的
为宜,相当于标准硫酸钾溶液1.0～5.0ml,在此范围内,混浊梯度明显,便于比较。
③供试品溶液加入盐酸使成酸性,可防止碳酸钡或磷酸钡等沉淀生成,影响比浊。以50ml供试品中含2ml稀盐酸为宜,若酸度过大可使硫酸钡溶解,降低检查灵敏度。
④采用25%氯化钡溶液,呈现的混浊度较稳定,使用时不必新配。
⑤供试溶液如需滤过,应预先用盐酸酸化的蒸馏水洗净滤纸中的硫酸盐。
⑥供试品如有色,采用内消色法处理。
⑦温度对混浊有影响,操作温度一般控制在25～30℃,若温度太低,产生的白色混浊既慢又少,且不稳定。故室温低于10℃时,应将比色管在25～30℃水浴中放置10min,再进行比较。
3.铁盐检查法
微量铁盐的存在可能会加速药物的氧化和降解,因此需控制其存在量,《中华人民共和国药典》(2015)采用硫氰酸盐法。
(1)原理
铁盐在盐酸酸性溶液中,与硫氰酸盐作用生成红色可溶性的硫氰酸铁配离子,与一定量标准铁溶液用同法处理后进行比较。
(2)操作方法
除另有规定外,取一定量的供试品,加水溶解成25ml,移置50ml纳氏比色管,加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg,用水稀释成35ml后,加30%硫氰酸铵溶液3ml,再加水适量稀释成50ml,摇匀;如显色,立即与标准铁溶液一定量制成的对照溶液(取各药品项下规定量的标准铁溶液,置50ml纳氏比色管中,加水使成25ml,加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg,用水稀释使成35ml,加30%硫氰酸铵溶液3ml,再加水适量稀释成50ml,摇匀)比较,即得。
如供试液管与对照液管色调不一致时,可分别移入分液漏斗中,各加正丁醇20ml提取,使分层后,将正丁醇层移至50ml纳氏比色管中,再用正丁醇稀释至25ml,比较,即得。
(3)测定条件
①标准铁溶液的制备 称取硫酸铁铵0.863g于1000ml量瓶中,加水溶解后,加硫酸2.5ml,用水稀释至刻度,摇匀,作为贮备液。临用前,精密量取贮备液10ml,置100ml量瓶中,定容(每1ml相当于10μg的铁)。
②在测定条件下,适宜的比色浓度为50ml中含铁10～50μg,相当于标准铁溶液1.0~5.0ml,在此范围内色泽梯度明显。
③加入盐酸,可加速Fe3+的水解,以5ml溶液中含稀盐酸4ml为宜。
④加入氧化剂过硫酸铵将供试品中Fe2+氧化成Fe3+,同时可防止硫氰酸铁因光照还原或分解褪色。
⑤铁盐与硫氰酸根离子的反应为可逆反应,入过量的硫氰酸铵可增加产物配离子的稳定性,提高反应灵敏度,还能消除
枸橼酸等离子与Fe3+形成有色配合物而干扰检查。
⑥某些药物如葡萄糖、糊精、硫酸氢钠和硫酸镁等在检查过程中加硝酸处理,则不再加过硫酸铵,但必须加热煮沸除去一氧化氮,因硝酸中可能含亚硝酸,能与硫氰酸根离子作用,生成红色亚硝酰硫氰化物,影响比色。
