BL21（DE3）表达的最佳条件是什么
E.coli Electro-Cells
E.coli Electro-Cell JM109
制品名 TaKaRa Code 包装量 价格(人民币元)
E.coli Electro-Cell JM109 D9022 1 Set (50 μl×10支) 300
■ Genotype
E.coli JM109
recA1, endA1, gyrA96, thi-1, hsdR17, supE44, relA1,
Δ(lac-proAB)/F'[traD36, proAB+, lac Iq, lacZ ΔM15]
■ 细胞浓度
1～2×1010 Bacteria/ml
■ 保存
-80℃
■制品说明
用高电压脉冲电流瞬间击穿大肠杆菌，从而导致DNA转入大肠杆菌内的转化方法称为电穿孔法。电穿孔法是各种转化方法中效率最佳的方法之一，比Ca2+处理的感受态细胞的转化效率高，在转化少量DNA时，特别能发挥其特有的威力。
TaKaRa使用独自开发的菌体培养法，制作出了效果极佳的E.coli Electro-Cell JM109。
■细胞种类
α-互补性选择宿主E.coli JM109
E.coli JM109在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时, 由于载体DNA产生的LacZα多肽和JM109 F'编码的lacZΔM15的结合，显示β-半乳糖苷酶活性 (α-互补性)。利用这一特性，可以很容易鉴别重组体菌株。因为具有F'质粒，除可用于制作基因库、进行亚克隆等之外，也可作为M13载体DNA的宿主，调制单链DNA。
■质量标准
使用10 pg的质粒DNA进行转化时：
50 μl E.coli JM109 Electro-Cell/10 pg pUC19 plasmid转化时产生的菌落数
>1×109 transformants/1 μg pUC19 plasmid
F'质粒的稳定性检测
对E.coli JM109使用pUC19 DNA进行电穿孔法转化后，在含有100 μg/ml的Ampicillin、0.2 mM的IPTG, 40 μg/ml的X-Gal的L-琼脂平板培养基上，产生的白色菌落在1%以下。
50 μl的E.coli JM109 Electro-Cell在含有100 μg/ml的Ampicillin L-琼脂平板培养基上不产生菌落。
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BL21（DE3）pLysS细菌菌株
BL21（DE3）pLysS细菌菌株可以表达T7控制并核糖体结合位点的高效蛋白表达。BL21（DE3）pLysS对λDE3（1）是溶源性的。λDE3含有T7噬菌体基因I，编码的T7 RNA聚合酶受lac UV5启动子的控制。BL21（DE3）pLysS含有pLysS质粒，他携带编码T7溶菌酶基因。在T7启动子控制下，T7溶菌酶降低靶基因的背景表达但并不干扰由IPTG诱导的表达水平。
