异亮氨酸的检查和鉴别方法
鉴别
(1)取本品约10mg,置试管中,加水2ml溶解后,加氨制硝酸银试液1ml,即发生气泡与黑色浑浊,并在试管壁上生成银镜(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集166图)一致
检查
酸碱度取本品0.50g,加水10m1溶解后,依法测定(通则0631),pH值应为6.0~8.0溶液的澄清度与颜色取本品1.0g,加水10ml溶解后,溶液应澄清无色;如显浑浊,与1号浊度标准液(通则0902第法)比较,不得更浓;如显色,与同体积的对照液(取比色用重铬酸钾液3.0ml与比色用硫酸铜液0.10ml,用水稀释至250ml)比较,不得更深游离肼照薄层色谱法(通则0502)试验。溶剂丙酮水(1:1)供试品溶液取本品适量,加溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1g的溶液。对照品溶液取硫酸肼对照品适量,加溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含80g(相当于游离肼20g)的溶液。系统适用性溶液取异烟肼与硫酸肼各适量,加溶剂溶解并稀释制成每lml中分别含异烟肼O.lg与硫酸肼80μg的混合溶液。色谱条件采用硅胶G薄层板,以异丙醇-丙酮(3:2)为展开剂。系统适用性要求系统适用性溶液所显游离肼与异烟肼的斑点应完全分离,游离肼的R值约为0.75,异烟肼的R值约为0.56测定法吸取供试品溶液、对照品溶液与系统适用性溶液各5μ,分别点于同一薄层板上,展开,晾干,喷以乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液,15分钟后检视。限度在供试品溶液主斑点前方与对照品溶液主斑点相应的位置上,不得显黄色斑点。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量,加水溶解并稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液。对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置100ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.02mol/L磷酸氢二钠溶液(用磷酸调pH值至6.0)-甲醇85:15)为流动相;检测波长为262nm;进样体积10pl系统适用性要求理论板数按异烟肼峰计算不低于4000。测定法精密量取供试品溶液与对照溶液分别注人液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的3.5倍限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.35倍(0.35%),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积(1.0%)干燥失重取本品,在105℃干燥至恒重,减失重量不得过0.5%(通则0831)炽灼残渣取本品1.0g,依法检查(通则0841),遗留残渣不得过0.1%。重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣,依法检查(通则0821第二法),含重金属不得过百万分之十。无菌取本品,用适宜溶剂溶解后,经薄膜过滤法处理,依法检查(通则1101),应符合规定。(供无菌分装用)
