尿分析和尿标本的收集、运送和保存、批准准则(5)
5.3显微镜检查
下列要求适用于离心尿液
显微镜检查结果的一致性是最基本的要求。一份书写适当,且关于进行各程序的操作手册,有助于保证实验室内全体人员以相同方式进行显微镜检查。每个人必须以同样方法检测沉渣,寻找存在的同样沉渣物,并用同样的标准去鉴定。
推荐实验室使用标化的商品系统,它能报告每单位体积异常沉淀物含量以代替每高倍或低倍视野的个数,用于实验室间的比较。实验室内需要标化的特殊因素,及每个相关的值列于下。
商品系统检测技术能提供相同的结果,这些技术可使用较小的量,并用不同的时间和速度进行检测,特殊系统厂商的建议应遵守。
如下的要求是根据传统方法学的知识定出的。
5.3.1检测的尿量
在研究所内用于检测的尿量必须标准化(如10-12及15 ml是常用的量),如用更小的量(如儿科、新生儿),在最终报告时应注明。
5.3.2离心时间
为保证所有标本有同样的沉淀物,推荐离心时间为5分钟。
5.3.3离心速度
推荐的相对离心力(RCF)大约为400。如用每分钟转数(RPM)计算特定的离心机相对离心力(RCF)用下式计算:
RCF=1.118×10-5×r×N2
此处
RCF=相对离心力
r=半径,单位:厘米(从旋转中心到试管底部)
N=每分钟转数
5.3.4沉渣的浓缩因素
所有尿标本都应浓缩到相同体积,有标化的商品系统,使用特殊的试管或吸管,保留特定体积的尿沉渣。
5.3.5被检沉渣的体积
有标化的商品系统提供,具有一定体积计数室的玻片,可装填特定量的浓缩沉渣。
5.3.6玻片及盖片
如使用玻璃的显微镜载片及盖片,推荐下列的尿沉渣检测和计算方法。
(1) 测量已混匀准备离心的尿体积。
(2) 标化离心条件(时间和速度)
(3) 测量留在管内的尿沉渣体积
(4) 检测放到玻片上的沉渣量
(5) 使用一标化的盖片
(6) 记录显微镜高倍镜的放大率
(7) 记录高倍视野的直径
(8) 计算并报告每毫升尿液的成份。例如用15ml尿
·高倍视野直径=0.35mm
·高倍视野的面积=0.096mm2
·盖片下的面积=484mm2
· =5040盖片下的高倍视野
·测定0.020ml在玻片上的沉渣≈1.2ml尿
·5040高倍视野≈1.2ml尿≈4000高倍视野/ml
因此
(数量/高倍视野)×4000=计数值/ml
5.3.7报告格式
在一定指定研究所每一个做显微镜检查的人都应采用相同的术语,报告格式和参考范围。并于哪种有形成份应该报告和计数,应由各个实验室根据病人群体和做试验人员的职业熟练程度作出决定。