应用SpectraMax微孔板检测系统和CyQUANT试剂盒检测细胞增殖2
设置仪器和软件参数
步骤1：打开微孔板读板仪开关，打开SoftMaxPro软件并点击ProtocolLibrary中CellGrowth&Viability文件夹中的CyQUANTFluorescenceprotocol。
步骤2：按表中所示参数设置仪器，此设置已在预配置的列表中。
步骤3：使用TemplateEditor设置孔板加样的模板，包括标准样品孔(每孔的细胞数)、空白对照孔(无细胞)和样品孔的位置。模板设置的列子如图1所示。注意，同时点击Ctrl和Shift键将显示每个孔的设置值，样品的名字(Un01-Un02)没有出现在所示图中。
步骤4：将微孔板放于读板机中，如果您的读板机顶读法需要放置适配器(如SpectraMaxM5)，请先放置适配器后再放入样品。
步骤5：点击软件的Read键，仪器将对微孔板进行读值，相关的荧光值(RFUs)将出现在软件的孔板位置。
数据分析
步骤1：如果设置了模板，微孔板读值后，在Grouptable里将会自动出现计算后的结果。
步骤2：TemplateEditor里设置了标准曲线组的话，标准曲线将会有软件自动生成。在CurveFit下拉菜单里可以选择拟合曲线公式，本应用说明的标准曲线选择的是log-log曲线拟合(图2)。也可以用quadratic曲线。
步骤3：计算实验样品每孔的细胞个数。软件通过标准曲线公式计算出每个实验样品的浓度，并显示在Unknownsgroup部分。
基于细胞的标准曲线结果
基于细胞的标准曲线如前文所述，呈现在图2中。在生成标准曲线时采用了log-log拟合算法，图中所示结果是SpectraMaxM5微孔板读板机得到的，MolecularDevices公司的其他具有荧光功能的读板机均可得到相似结果(数据未显示)。
表3为表1中所列出的CHO-K1细胞样品培养两天的增殖数据结果，培养第二天的细胞增殖结果由SoftMaxPro软件用基于细胞的标准曲线计算得出。
