用SpectraMax多功能微孔板读板机进行cAMP HiRange检测（二）
Z’ 因子由阴性(无cAMP，无cAMP-d2)和阳性质控(无cAMP)计算得到2。
利用SoftMax® Pro软件生成和分析数据，包含一些预设的HTRF实验模板以简化检测和分析。
结果
使用SoftMax Pro软件的4-参数曲线拟合如上所述进行数据分析和做图。依据表2的读板机参数设置获得最佳结果。当延迟时间、整合时间和脉冲数增加，会观察到DF%的下降。与白色微孔板(图2)相比，使用黑色低体积384-孔微孔板可使检测窗从3020增加到3253。然而，Z’ 因子，考虑到阳性和阴性质控的检测窗和标准差以及EC 50值在两个孔板类型中非常相似(表3)。(注意：当使用SpectraMax M5e多功能微孔板读板机，需要白色孔板。)
SpectraMax i3和SpectraMax Paradigm读板机在逐一比较相同测试孔板时得到的结果基本一致(图3)。针对这一测试，利用了白色微孔板。检测窗为3004和3051，且Z’ 因子分别是0.92和0.90。EC50值是19.1nM，相比于发布值(表3)。SpectraMaxM5e多功能微孔板读板机得到相似的Z’因子和EC50值。
SpectraMax Paradigm读板机得益于双PMT配置而比其他读板机更快，使之可以同时读取两个HTRF发射波长(表3)。
总结
SpectraMaxi3和SpectraMaxParadigm读板机可配置具有高通量筛选能力且HTRF认证的检测卡盒。当在SpectraMaxParadigm读板机上使用时，此卡盒能进行双发射同时检测从而加快读数速度。在三个读板机中，cAMPHiRange测定得到的完美Z’因子表明了多功能检测系统的可靠性能。采用SoftMaxPro软件自带的HTRF预设实验模板大大简化了数据采集和分析。
参考
1. http://www.htrf.com/htrf-technology
2. Zhang,
J. H., Chung, T. D. Y., and Oldenburg,K. R. (1999). A simple statistical
parameter for use in evaluation and validation of highthrough put
screening assays J. Biomolecular Screening4(2): 67-73.
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