拟南芥的培养
实验概要
本实验方法就拟南芥的培养技术进行了简单介绍。
主要试剂
1. PNS营养液:
每升含2.5m1 1M磷酸缓冲液(pH5.5)
5ml 1M KN03，
2m1 1M MgSO4.7H20，
2m1 1M Ca(N03)a.4H20，
2.5m1 20mM Fe.EDTA，
1 ml MS微量兀素。
2. 人工土:
3份蛭石，1份珍珠岩和1份黑土混合。
实验步骤
1. 将拟南芥种子种于浇过饱和PNS营养液的人工土中，当年收获的种子种植后4oC春化72h，隔年种子种植后春化24h.然后转入人工培养室中在相对湿度80%，恒温20-24oC，光照强度80-200umo1/M2/S，光照周期为8h黑暗、16h光照培养。
2. 拟南芥的垂直培养:
将拟南芥的种子首先用70%的乙醇处理2分钟，再用稀释10倍的次氯酸钠溶液，加一滴吐温40(每50毫升1滴)，处理15分钟，其间不断的悬浮种子以保证消毒彻底。然后用无菌水洗4-5次。将种子用火过菌的牙签点在加有激素、糖类或空白的PNS固体培养基平板上。培养基不能太厚，否则影响光照和观察。4oC低温处理1-3天，在培养室(24oC)竖直平板，进行连续光照培养。
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