RT-PCR需要多大的细胞量及操作步骤
理论上50个cell就可以，但是实际操作中我只看到过牛人从100个cell里面提出来过（用LCM逮的），自己提弄过1000cell的。没有用kit。不同点是用BCP代替氯仿，并且加糖原助沉淀，具体的好处不是很清楚，但是BCP用量小，而且在cell少的情况下，使用糖原可以尽量的降低误操作。
由于细胞的大小，RNA量以及你作用时间的差别，不同细胞在抽提RNA的量不一致，初作RNA提取时一般选择6孔板（或35mm版）做，每孔1.5-2ml，这样你的作用药品不用使用很多，RNA提取的量也有保证。以hela 为例，接种量在50万左右，待细胞长到90%时加药品（加入时间一般以你的作用时长为基点，估计到收集时长满），一般提取RNA作用时间不会太长，几个小时而已，所以细胞应长得接近饱和时加入药品，之后收集细胞，提取RNA步骤就一样了，提取的一孔RNA在10-20ug，这些已足够RT使用，具体提取方法站内有许多，搜索就可以了。
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