使用紫外-可见分光光度法测定维生素B1片的含量
一、实验资料
1、检验药品
(1)检验药品的名称 维生素B1片。
(2)检验药品的来源 市场购买或送检样品。
(3)检验药品的规格、批号、包装及数量 根据药品包装确定,并记录有关情况。
2、质量标准
(1)检验依据 《中国药典》(2010版)二部896页“维生素B1片”。
(2)含量测定 取本品20片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于维生素B125mg),置100mL量瓶中,加盐酸溶液(9→1000)约70mL,振摇15min使维生素B1溶解,加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度,摇匀,用干燥滤纸滤过,精密量取续滤液5mL,置另一100mL量瓶中,再加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度,摇匀,照紫外-可见分光光度法[《中国药典》(2010版)附录Ⅳ A],在246nm的波长处测定吸光度,按C12H17ClN4OS • HCl的吸收系数(
)为421计算,即得。
本品含维生素B1(C12H17ClN4OS • HCl)应为标示量的90.0%～110.0%。
3、检验原理
紫外吸收:维生素B1分子中有共轭双键,在紫外光区具有特征吸收峰,测定其最大吸收波长处的吸光度即可计算其含量。
定量基础:紫外-可见吸收光谱为物质对紫外-可见光区辐射的能量吸收光谱,符合光的吸收定律(朗伯-比尔定律),即在一定实验条件下,供试品溶液的吸光度与其浓度和液层的厚度成正比。它是紫外-可见分光光度法的定量依据。吸收定律可表示如下:
A=Elc
式中 A——吸光度
l——液层厚度
c——溶液浓度
E——吸收系数,即单位浓度、单位液层厚度时的吸光度
吸收系数有两种表示方式。
(1)摩尔吸收系数(ε) 指在一定波长下溶液浓度为1mol/L,液层厚度为1cm时的吸光度。
(2)百分吸收系数(
) 指在一定波长下,溶液浓度为1%(g/100mL),液层厚度为1cm时的吸光度。
二、实验过程
1、仪器、试药的准备及试液的配制
1)仪器的准备
紫外-可见分光光度计(配对石英比色皿)研钵、电子或分析天平(感量为0.1mg)、超声波仪、离心机、滤纸、量筒、容量瓶(100mL,2个)、漏斗、玻璃棒、移液管(5mL)。
2)试药试液的准备
维生素B1片,盐酸溶液(9→1000)。
2、操作步骤
(1)检查仪器和比色皿是否齐全,是否有破损,开机预热20min。
(2)检查仪器波长的正确性和1cm石英吸收池的成套性。
(3)取本品20片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于维生素B125mg),置100mL量瓶中,加盐酸溶液(9-1000)约70mL,振摇15min使维生素B1溶解,加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度。
(4)用干燥滤纸滤过,精密量取续滤液5mL,置另一100mL量瓶中,再加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度,摇匀。
(5)用1cm石英吸收池,以盐酸溶液(9→1000)作为参比溶液,在246nm的波长处测定供试品溶液吸光度。
3、结果计算
1)计算
按C12H17ClN4OS • HCl的吸收系数(
)为421计算,即得
式中 A——供试品溶液的吸光度
——供试品溶液的百分吸收系数
l——吸收池的厚度
D——供试品的稀释倍数
V——供试品溶液的体积
W——供试品的取样量
2)结果判定
(1)结果判定依据 本品含维生素B1(12C12H17ClN4OS • HCl应为标示量的90.0%～110.0%。
(2)判定原则 如果含量计算结果在规定的范围内,则该项检查判为“符合规定”。
3)检验原始记录
4)检验报告书
