紫外-可见分光光度法检测维生素类药物及其制剂含量
维生素B1分子中有共轭双键,在紫外-可见区有吸收。pH=2时,维生素B1在246nm处有最大吸收,吸收系数为421。《中国药典》2010年版采用紫外-可见分光光度法测定维生素B1片及注射液的含量。维生素A分子中有共多烯侧链,在325～328nm的波长范围内有最大吸收。
1.维生素B1片的含量测定方法取本品20片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于维生素B125mg),置100ml量瓶中加盐酸溶液(9→1000)约70ml,振摇15分钟使维生素B1溶解,用上述溶剂稀释至刻度,摇匀,用干燥滤纸滤过,精密量取续滤液5ml,置另一100ml量瓶中,再加上述溶剂稀释至刻度,摇匀,照紫外-可见分光光度法,在246nm的波长处测定吸光度,按C12H17ClN4OS·HCl的吸收系数为421计算,即得。本品含维生素B1(C12H17ClN4OS·HCl)应为标示量的90.0%-110.0%。
2.维生素B注射液的含量测定方法精密量取本品适量(约相当维生素B150mg)置200m量瓶中,加水稀释至刻度,匀,精密量取5ml,100ml量瓶中,加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度,照分光光度法,在246nm的波长处测定吸度,按C12H17ClN4OS·HCl的吸收系数为421计算,即得。本品含维生素B1(C12H17ClN4OS·HCl)应为标示量的93.0%~107.0%。
3.维生素A的含量测定方法(第一法)取供试品适量,精密称定,加环已烷溶解定量稀释制成每1m中含9-15U的溶液,照紫外一见分光光度法,测定其收的波长,并在表中所列各波长处测定吸光度,计算各光度与波长328nm处吸光度的比值和波长328处的值。本品含维生素A应为标示量的70%～103.0%。
如果吸收峰波长为326～320mm,且所测得各波长吸光度比值不超过表中规定的±0.02,可用下式计算含量:
每1g供试品中含有的维生素A的单位=
×1900
如果吸收峰波长为326～329nm,但所测得的各波长吸光度比值超过表中规定值的±0.02,应按下式求出校正后的吸光度,然后再计算含量:
如果在328nm处的校正吸光度与未校正吸光度相差不超过±3.0%,则不用校正吸光度,仍以未经校正的吸光度计算含量。
如果校正吸光度与未校正吸光度相差为-15%~-3%则以校正吸光度计算含量如果校正吸光度超出未校正吸光度的-15%~-3%或者吸收峰波长不326~329nm,则供试品须按“皂化法”测定。
