药物检测技术--溶出度测定法及注意事项
溶出度是指活性药物从片剂、胶囊剂或颗粒剂等普通制剂在规定条件下溶出的速率和程度。在缓释制剂、控释制剂、肠溶制剂及透皮贴剂等制剂中也称释放度。
固体制剂中的药物只有溶解之后,才能被机体吸收,而崩解只是药物溶出的最初阶段,还不能客观反映药物在体内溶出的全过程。药物在体内吸收的速度通常由溶解的快慢而决定。因此,溶出度是评价固体制剂内在质量的重要指标之一,是观察生物利用度的一种体外试验法。
《中华人民共和国药典》(2015年版)收载5种测定方法:转篮法、浆法、小杯法、桨碟法、转筒法。溶出度测定法的基本原理是将某种固体制剂的一定量分别置于溶出度仪的转篮(或烧杯)中,在37.0℃±0.5℃恒温下,在规定的转速,介质中依法检查,在规定的时间测定其溶出的量。
2.仪器装置
溶出度仪由同步电动机、恒温循环水浴箱溶出系统(溶出杯、搅拌装置、溶出介质)、计时装置、加热器、取样装置等部件组成。《中华人民共和国药典》对不同测试方法中溶出度仪的重要的部件的形状与尺寸做出了具体的规定。
3.操作方法
(1)第一法(转篮法)
测定前,应对仪器装置进行必要的调试,使转篮底部距溶出杯的内底部(25±2)mm。分别量取经脱气处理的溶出介质,注入每个溶出杯中,加温使溶出介质温度保持在37.0℃±0.5℃,取供试品6片(粒、袋),分别投入6个干燥的转篮内,按照各品种项下的规定调节电动机转速,待其平稳后,将转篮降入容器中,自供试品接触溶出介质起立即开始计时;至定的取样时间(缓控释制剂至少采用三个取样点),取样位置应在转篮顶端至液面的中点,距溶出杯内壁不小于10mm处,吸取溶液适量,立即经适当微孔滤膜滤过,自取样至滤过应在30s内完成。取澄清滤液照该品种项下规定的方法测定,计算出每片(粒、袋)的溶出量。
(2)第二法(桨法)
用搅拌桨代替转篮,供试品放在容器中,测定方法与转篮法相同。除另有规定外,片剂或胶囊剂浮于液面,应先将其装入沉降篮内,在沉入溶出杯中时进行测试。取样位置应在桨叶顶端至液面的中点,距溶出杯内壁不小于10mm处。
肠溶制剂:
方法一
①酸中溶出量:除另有规定外,量取0.1mol/L HCl溶液750ml,注入每个容器,加温使溶液温度保持在(37.0±0.5)℃,取6片(粒)分别投入转篮或容器中,按各药品项下规定的转速启动仪器,运转2h后,在规定取样点吸取溶液适量,立即滤过,自取样至滤过应在30s内完成,滤液按各药品项下规定的方法测定,计算每片(粒)酸中溶出量。
②缓冲液中溶出量:上述酸液中加入0.2mol/L磷酸钠溶液250ml(必要时用2mol/L HCl溶液或2mol/L NaOH溶液调节pH值至6.8),继续运转45min,或按各药品项下规定的时间,在规定取样点吸取溶液适量,立即滤过,自取样至滤过应在30s内完成,按各药品项下规定的方法测定,算出每片(粒)的缓冲液中溶出量。
方法二
①酸中溶出量:除另有规定外,量取0.1mol/L HCl溶液900ml,注入每个容器,按照方法一酸中溶出量测定方法进行测定。
②缓冲液中溶出量:弃去上述各容器中酸液,立即加入磷酸盐缓冲液(取0.1mol/L HCl溶液和0.2mol/LNa3PO4溶液,按3:1混合均匀,必要时用2mol/L HCl溶液或2mol/L NaOH溶液调节pH值至6.8)900ml,或将每片(粒)转移入另1个盛有磷酸盐缓冲液(pH值6.8)900ml的容器中,按照方法一缓冲液中溶出量项进行测定。
(3)第三法(小杯法)
本法容器为250ml、内径为(62±3)mm、高为(126±6)mm的溶出杯。其余要求同转篮法。操作同桨法。本法适用于含量较低的片剂的溶出度测定。测定前,应对仪器设置进行必要的调试,使桨叶底部距溶出杯的内底部15mm±2mm。除有规定外,量取经脱气处理的溶剂100～250ml注入每个操作容器内(用于胶囊剂测定时,如胶囊上浮,可用一小段耐腐蚀的细金属丝轻绕于胶囊外壳)。取样位置应在桨叶顶端至液面的中点,距溶出杯内壁6mm处。以下操作同桨法。
第二法、第三法用于胶囊剂测定时,如胶囊上浮,可用一小段耐腐蚀的金属线轻绕于胶,或将胶囊装入耐腐蚀的金属沉降篮内。
(4)第四法(桨碟法)
方法一搅拌桨、溶出杯按照第二法,但另用网碟组成其桨碟装置。
方法二除将方法一的网碟换成其他类型的网碟外,其他装置和要求与方法一相同。
透皮贴剂 分别量取溶出介质置各溶出杯内,待释放溶出介质预温至32.0℃±0.5℃,将透皮贴剂固定于两层碟片之间(方法一)或网碟上(方法二),溶出面朝上,尽可能使其保持平整。再将网碟水平放置于溶出杯下部,并使贴剂与桨底旋转面平行,两者相距25mm±2mm,按品种正文规定的转速启动装置。在规定取样时间点,吸取溶液适量,及时补充相同体积的温度为32.0℃±0.5℃的空白释放溶出介质。取样位置应在桨叶顶端至液面的中点,距溶出杯内壁10mm处。
(5)第五法(转筒法)
溶出杯按桨法,但搅拌桨另用不锈钢转筒装置替代。组成搅拌装置的杆和转筒均由不锈钢焊接而成,应不影响被测物质的测定。
透皮贴剂 分别量取释放溶出介质置各溶出杯内,待释放溶出介质预温至32.0℃±0.5℃,除另有规定外,按下述进行准备:除去贴剂的保护套,将有黏性的一面置于一片铜纺上,铜纺的边比贴剂的边至少大1cm。将贴剂的铜纺覆盖面朝下放置于干净的表面,涂布适宜的黏合剂于多余的铜纺边。如需要将黏附剂涂布于贴剂背面。干燥1min,仔细将贴剂涂有黏合剂的面安装于转筒外部,使贴剂的长轴通过转筒的圆心。挤压铜纺面除去引入的气泡。将转筒安装在仪器中,试验过程中保持转筒底部距溶出杯内底部25mm±2mm,立即按品种正文规定的转速启动仪器。在规定取样时间点,吸取溶液适量,及时补充相同体积的温度为32.0℃±0.5℃的空白释放溶出介质取样位置在介质液面与转筒顶部的中间位置,距溶出杯内壁10mm处。同法测定其他透皮贴剂。
4.结果判断
取供试品6片(粒、袋),测定每片(个)的溶出量,按标示含量计算,进行判断。除另有规定外,应符合下列规定。
5.注意事项
(1)为使同一种药物的溶出度测定得到良好的再现性,应对新安装的溶出度仪采用溶出度校正片进行校正,对已使用过的仪器也应定期进行校正。
(2)第一法在转篮降入溶剂时,立即开始计时;第二法、第三法在供试品接触液面时,立即开始计时。
(3)达到规定溶出时间时,应在仪器开动的情况下取样,实际取样时间与规定时间的差异不得超过±2%;自6杯中完成取样应在1min内。
(4)水浴中的水应保持清洁,定期更换;水浴液面应高于圆底烧杯内溶剂的液面。
(5)溶出介质中溶解氧会影响药物释放速度,特别是第一法,气泡会堵塞转篮孔,造成溶出率降低。应新鲜配制和经脱气处理,预热后加入溶出杯中,并加有机玻璃盖,保持每个圆底烧杯内溶剂的温度为(37.0±0.5)℃;如果溶出介质为缓冲液,当需要调节pH值时,一般调节pH值至规定pH值±0.05之内。
(6)溶出介质实际量取体积与规定体积的偏差应不超过±1%。
(7)如胶囊壳对分析有干扰,应取不少于粒胶囊,除尽内容物后,置一个溶出杯内,按该品种项下规定的分析方法测定每个空胶囊的空白值,做必要的校正。如校正值大于标示量的25%,试验无效。如校正值不大于标示量的2%,可忽略不计。
(8)实验结束后,应将篮轴、篮体或搅拌桨从电机上取下,用蒸馏水冲洗,晾干后妥善保存,避免转轴变形。
