专栏 | 快速蛋白沉淀法进行多种类固醇激素的同时检测
导读
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SCIEX“临床质谱先锋应用专栏”,将持续为大家带来创新、开拓性的质谱临床应用资讯,让质谱更好更多的为临床服务。
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人体内类固醇激素水平的异常与一系列疾病的发生密切相关,包括先天性肾上腺皮质增生、肾上腺肿瘤、原发性醛固酮增多症、多囊卵巢综合征、库欣综合征等,其精准定量检测在上述内分泌相关疾病的诊疗中具有重要的价值。近年来,利用液相色谱-质谱 (liquid chromatography-mass spectrometry, LC-MS/MS) 技术检测类固醇激素普遍应用于国外医学检验实验室,为内分泌疾病精准诊疗提供了革命性的助力。
然而,质谱检测类固醇激素也面临如下挑战:
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类固醇激素的检测对质谱仪器的性能提出了很高的要求:正常人体液样本中的大部分类固醇激素水平极低,一般在ng/ml的水平,多种激素同时检测更需要高选择性、高灵敏度以及宽动态范围的高性能质谱平台。
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前处理的选择:由于体内激素含量较低,前处理需要在保留、浓缩待测物的前提下去除尽可能多的杂质。对于临床检测,前处理方法的易行性也非常重要。目前对于类固醇质谱检测的前处理方法,多采用固相萃取(SPE)的方法,但是存在操作复杂,耗材成本较高等缺点。
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类固醇激素质谱检测在我国医学检验实验室的应用仍然处于起步阶段,这远远无法满足临床日益增长的精准化医疗的需求,如何突破挑战让更多的临床质谱实验室快速开展类固醇激素检测,为广大的内分泌疾病患者带来新的精准诊疗方案,SCIEX一直在思考,并成功探索出一套更加方便快捷可靠的类固醇质谱检测方案:快速蛋白沉淀法同时检测,让多快好省的类固醇质谱检测方法成为可能:
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样本用量少,只需50 µL样品即可满足分析需求;
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前处理蛋白沉淀法简单快速,减少样本前处理耗时,利于标准化;
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不需要使用SPE耗材及设备,节约成本;
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正负离子切换,Scheduled MRM™(分时间窗口扫描)检测模式,多种类固醇激素同时测定;
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方法检测灵敏度高,重现性好,动态范围宽,满足临床分析需求。
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图1. 快速蛋白沉淀法前处理流程
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快速蛋白沉淀法结合LC-MS/MS法测定血清中18种内源性类固醇激素,助力多种内分泌疾病的辅助诊断,如:先天性肾上腺皮质增生、多囊卵巢综合症、库欣综合征等。
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图2. 18种激素典型色谱图
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SCIEX液相色谱串联质谱系统助力PCOS(多囊卵巢综合征)相关类固醇激素的快速检测:2023年《多囊卵巢综合征雄激素质谱检测专家共识》隆重发布,提出建议“在进行高雄激素血症评估时,建议将LC-MS/MS作为测定雄激素的首选方法。”
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图3. PCOS相关激素典型色谱图
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SCIEX液相色谱串联质谱系统助力CAH(先天性肾上腺皮质增生症)相关类固醇激素的快速检测。
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图4. CAH相关激素典型色谱图
附:以上类固醇激素中英文对照表:
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文末寄语
LC-MS/MS技术为类固醇激素的检测带来了革命性的影响,准确定量人体内的类固醇激素不再是梦想,而是触手可及的现实。SCIEX愿与您同行,让临床质谱发挥更大的作用,为开拓为改变而努力。
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