关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

超速离心分离技术-密度梯度离心法

2021.11.01

密度梯度区带离心法是将样品加在惰性梯度介质中进行离心沉降或沉降平衡,在一定的离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。此方法主要依据颗粒与介质间的密度差(ρ-ρ0)不同进行分离的。适用于那些沉降系数相差不大而密度值却有明显差别的颗粒,也就是那些S值相近而ρ值相远的颗粒。惰性梯度介质在本法中的主要作用是防止液体介质对流混合从而确保分离后的各区带不受损害。具体方法还可以再分成两种:

(1)速率区带离心法:在速率区带离心法中,当不同的颗粒间存在沉降系数差时(不需要像差速沉降离心法所要求的那样大的沉降系数差),在一定的离心力作用下,颗粒各自以一定的速度沉降,在惰性梯度介质的不同区域上形成区带。

离心管先装好惰性梯度介质溶液,样品液加在梯度介质的液面上,离心时,由于离心力的作用,颗粒离开原样品层,按不同沉降速度向管底沉降,离心一定时间后,沉降的颗粒逐渐分开,最后形成一系列界面清楚的不连续区带,沉降系数越大,往下沉降越快,所呈现的区带也越低。离心必须在沉降zui快的大颗粒到达管底前结束,切忌无把握的延长离心时间,否则那些S值较小但ρ值较大的颗粒随着时间的延长将后来者居上,尤其是那些密度相近而沉降系数相远的颗粒将有机会集合在同一个等密度区带内,反而影响纯化分离。可见选准离心时间是本法的关键环节之一。

(2)等密度离心法:等密度离心法也叫ρ区带分离法,本法是使不同密度的各种颗粒分别停留在介质的相应密度梯度上,形成一条ρ=ρ0的等密度区带,从而达到分离的目的,故又称为ρ区带分离法。这种方法仅与颗粒的密度有关而与其大小、形状、S值等无关。离心时样品可以加到任何位置上。离心时间宜长不宜短。介质可以采用连续梯度,也可以采用不连续梯度。采用连续梯度时,这个密度梯度应包括所要分离的各种颗粒的密度范围。于是各不同密度的颗粒(ρ1、ρ2、ρ3…… )在离心时将分别沉降在与介质相应的密度区带位置上,各颗粒将按各自密度的大小依次排列成一条条的样品带而达到分离的目的。


推荐
关闭