超速离心分离技术-差速沉降离心法
差速沉降离心法
主要用于组织匀浆液中分离沉降系数相差较大的细胞器的浓缩和粗提。此法是依据各种颗粒的质量、形状和大小等不同，即Ｓ值不同，在同一离心加速度作用下，沉降速度上存在着快慢差异而得到分离的。它适用于纯化颗粒间Ｓ值相远，沉降系数差异较大的那些颗粒。
差速离心首先要选择好颗粒沉降所需的离心力和离心时间。当以一定的离心力在一定的离心时间内进行离心时，在离心管底部就会得到zui大和zui重颗粒的沉淀，分出的上清液在加大转速下再进行离心，又得到第二部分较大较重颗粒的沉淀及含较小和较轻颗粒的上清液，如此多次离心处理，即能把液体中的不同颗粒较好地分离开。此法所得的沉淀是不均一的，仍杂有其他成分，需经过２～３次的再悬浮和再离心，才能得到较纯的颗粒。
例如分离某种组织匀桨通过逐级增加离心加速度和离心时间，使各种不同的颗粒依次沉降。沉降顺序首先是整个细胞和组织碎片，其次是核、线粒体、溶酶体、微粒体，zui后是核蛋白体及某些大分子。
差速离心的优点是操作简易，离心后用倾倒法即可将上清液与沉淀分开，并可使用容量较大的角式转子。缺点是须多次离心，沉淀中有夹带，分离效果差，不能一次得到纯颗粒，沉淀于管底的颗粒受挤压，容易变性失活。
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