米氏常数的计算方法
Km即是当反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。从v—[s]矩形双曲线上可得V，再从V/2处可求得Km值，但实际上，即使用很大的底物浓度，也只能得到趋近于V的反应速度，而达不到真正的V，因此测不到准确的Km值，为了得到准确的Km值，可以把米氏方程式加以改变，使之成为斜截式：y=kx+b的直线方程，然后用图解法求出Km值 。
1.LineweaverBurk方程（双倒数作图法）
1/V=Km+[S]/Vmax[S]改写成1/V=Km/Vmax[S]+1/Vmax
实验时选择不同的[S]测定相应的v，求出两者的倒数，以1/v对1/[S]绘出工作曲线如下图，然后利用斜率，换算出Km。
实际上，由于操作条件和操作技能所限，以及操作时准确度达不倒要求，引入误差太大等原因，常常得不到这样的一条理想的直线，那么它的斜率就不是一个定值，因而Km的值就不能直接由这种作图法求出，或求出的Km值不准确。如果令1/v=0，则1/[S]的截距为-1/Km，然后根据具体的数值，换算出Km。但这需要在实验操作的同时要进行相关的推导和计算，并且是在明确1/[S]的截距与Km关系的前提之下 。
2.Hanes作图法
[S]/V=1/Vmax[S]+Km/Vmax
上式也是直线方程式，称为Hanes方程式。用[S]/V对[S]作图，所得直线的斜率为1/Vmax，[S]/V轴上的截距为Km/Vmax，而[S]轴上的截距为-Km。Hanes法的优点为数据点在坐标图中的分布较平坦，但因[S]/V包含两个变数，这就增大了误差，且统计处理也复杂得多。
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