红细胞酶测定的操作方法
1.葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的荧光斑点试验
(1)标本采集:乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na),ACD(枸缘酸、枸缘酸三钠、葡萄糖)或肝素抗凝全血,若放4℃保存,可稳定1周;也可用肝素化毛细管从手指或足跟采取末梢血液。
(2)取3支小试管,标明患者、正常对照和阳性对照,向各管加入0.2ml混合试剂。分别向各管加入患者、正常和阳性的抗凝全血0.02ml,混匀后室温放置。
(3)在反应0分钟、5分钟、10分钟后,分别从各管吸出反应液1滴,置于新华1号滤纸上,使充分干燥。
(4)在暗室内,用紫外线照射滤纸上的斑点,检查是否有荧光。
2.丙酮酸激酶的荧光斑点试验
(1)用肝素、EDTA或ACD抗凝患者和正常人血。
(2)以1000 r/min离心沉淀5分钟,吸弃血浆和白细胞层。用生理盐水配成20%的红细胞悬液。
(3)取2支试管,分别加入0.2ml混合试剂,并加入患者和对照红细胞悬液0.02ml,混匀,置于37℃水浴中。
(4)试液反应0分钟、10分钟、20分钟、30分钟、60分钟后,分别取患者和对照的微量反应液,在1号滤纸上点样。
(5)在紫外灯下观察结果。
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