组织的分离实验_胶原酶消化分离法
实验方法原理 | 胶原酶是一种由细菌中提取出的酶,对胶原有很强的消化作用,适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织等。 上皮细胞本身对胶原酶有一定耐性,但胶原酶对细胞间质有好的消化作用,可使上皮细胞与胶原成分脱离而不受伤害,效果甚好。 此酶在钙和镁离子存在情况下仍有活性,故可用BSS和含有血清的培养液配制。 |
---|---|
实验材料 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 把漂洗干净的组织剪切成1—5 mm3 块,向每一培养瓶中置入若干块;
经过胶原酶消化后的上皮组织,由于上皮细胞对酶有耐受性,可能有一些上皮细胞团尚未被完全消化开。成小团的上皮细胞比分散的单个上皮细胞更易生长,因此不必要再做进一步消化处理。胶原酶与胰蛋白酶并用时,尚可外加透明质酸酶。透明质酸酶对细胞表面糖基有作用。胶原酶与胰蛋白酶两者结合使用,对分散大鼠和兔肝等组织非常有效。
|
推荐