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酶法组织消化技术:从粗制的胶原酶到高纯度消化产品二

2020.6.29

罗氏高纯度研究级别酶混合物Liberase Research Grade Enzyme Blends

Liberase Research Grade Enzyme Blends包含了一系列酶混合物,它们由不同比例的中性蛋白酶(非梭菌蛋白酶)和高纯度Collagenase I + CollagenaseII混合组成。在绝大部分应用中,Liberase能替换传统的胶原酶,并增加细胞产率、细胞活性和细胞功能性。

 

在严格的酶发酵和纯化工艺条件下,Liberase Research Grade Enzyme Blends去除了梭菌蛋白酶和胰蛋白酶等杂酶,去除了原料中>98%的内毒素和其他死细胞成分,因此有助于在组织消化过程中,大大提升细胞的活率。Liberase系列产品均经过滤除菌,具有高度的批间一致性,保证了整个实验阶段的消化质量和重复性。

Liberase系列产品

胶原酶含量(mg/管)

胶原酶活性(Wünschunits/管)

中性蛋白酶量

中性蛋白酶作用于组织的酶活性

中性蛋白酶类型

内毒素

(EU/mg)

Liberase DL

5mg

50mg

26

260

+

Dispase

≤50

Liberase DH

5mg

50mg

26

260

+++

Dispase

≤50

Liberase TL

5mg

50mg

26

260

++

Thermolysin

≤50

Liberase TM

5mg

50mg

26

260

中等

++++

Thermolysin

≤50

Liberase TH

5mg

50mg

26

260

+++++

Thermolysin

≤50

 

罗氏胶原酶与Liberase系列产品的替换比较

罗氏胶原酶

特性

Wünschunits/mg

相应活性的Liberase产品

Collagenase A

粗制酶混合物

0.15

Liberase TM

Collagenase B

粗制酶混合物

0.15

Liberase TH

Collagenase D

粗制酶混合物

0.15

Liberase TM

Collagenase P

粗制酶混合物

1.50

Liberase TL, Liberase DL

Collagenase H

粗制酶混合物

0.15

Liberase TM

 

小贴士:

1.  Liberase系列产品根据胶原酶和中性蛋白酶的不同配比,分为不同消化活性的5种产品。您可以参考其他实验室的研究或已发表文献,进行合适产品的选择和操作流程参考。

https://www.roche-applied-science.com/sis/collagenase/index.jsp?id=col_030100

 

2.  对于新的组织细胞的消化尝试,建议从Liberase TM开始您的实验,Liberase TM的消化活性范围对各种组织具有良好的通用性。

 

3.  Liberase中Collagenase I + II 的纯度很高,与常规胶原酶消化实验相比,通常需将孵育时间减少10 –30%。

 

请注意:Liberase Research Grade产品和其他消化酶产品仅供生命科学研究和体外研究使用。请勿将此产品用于临床和诊断程序(如人胰岛移植)。

 


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