氧氟沙星的鉴别检查方法
鉴别
(1)照薄层色谱法(通则0502)试验。供试品溶液取本品适量,加0.1mol/L盐酸溶液适量每5mg氧氟沙星加0.lmol/L盐酸溶液1ml)使溶解,用乙醇稀释制成每1ml中约含1mg的溶液对照品溶液取氧氟沙星对照品适量,加0.1mol/L盐酸溶液适量(每5ng氧氟沙星加o.1mol/L盐酸溶液1ml)使溶解,用乙醇稀释制成每1ml中约含1mg的溶液系统适用性溶液取氧氟沙星对照品与环丙沙星对照品各适量,加0.1mol/L盐酸溶液适量(每5mg氧氟沙星加0.1mol/L盐酸溶液lml)使溶解,用乙醇稀释制成每1m中约含氧氟沙星1mg与环丙沙星1mg的溶液。色谱条件采用硅胶GFa4薄层板,以乙酸乙酯甲醇浓氨溶液(5:6:2)为展开剂。测定法吸取上述三种溶液各2,分别点于同一薄层板上,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm或365mm)下检视系统适用性要求系统适用性溶液应显两个完全分离的斑点。结果判定供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液主斑点的位置和颜色相同。(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集1003图)一致以上(1)、(2)两项可选做一项
检查
溶液的澄清度取本品5份,各0.50g,分别用氢氧化钠试液10ml溶解后,溶液应澄清;如显浑浊,与2号浊度标准液(通则0902第一法)比较,均不得更浓吸光度取本品0.10g,精密称定,精密加氢氧化钠试液10ml溶解后,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在450m的波长处测定吸光度,不得过0.25。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液取本品适量,精密称定,加0.1mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含1.2mg的溶液。对照溶液精密量取供试品溶液适量,用0.lmol/L盐酸溶液定量稀释制成每1m中约含2.4μg的溶液杂质A对照品溶液取杂质A对照品约18mg,精密称定,置100ml量瓶中,加6mol/L氨溶液1ml与水适量使溶解,用水稀释至刻度,摇匀,精密量取2ml,置100ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。系统适用性溶液取氧氟沙星对照品、环丙沙星对照品与杂质E对照品各适量,加0.1mol/L盐酸溶液溶解并稀释制成每1ml中约含氧氟沙星1.2mg、环丙沙星与杂质E各6μg的混合溶液灵敏度溶液精密量取对照溶液适量,用0.1mol/L盐酸溶液定量稀释制成每1ml中约含0.24μg的溶液色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以醋酸铵高氯酸钠溶液(取醋酸铵4.0g与高氯酸钠7.0g,加水1300ml使溶解,用磷酸调节pH值至2.2)-乙腈(85:15)为流动相A,以乙腈为流动相B,按下表进行线性梯度洗脱;流速为每分钟1.0ml;柱温为40℃;检测波长为294nm与238nm;进样体积10l时间(分钟)流动相A(%)动相B(%10018100100100系统适用性要求系统适用性溶液色谱图(294nm)中,氧氟沙星峰的保留时间约为15分钟;氧氟沙星峰与杂质E峰和氧氟沙星峰与环丙沙星峰间的分离度应分别大于2.0与2.5。灵敏度溶液色谱图(294nm)中,主成分峰高的信噪比应大于10测定法精密量取供试品溶液、对照溶液与杂质A对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,杂质A(238nm)按外标法以峰面积计算,不得过0.3%;其他单个杂质(294nm)峰面积不得大于对照溶液的主峰面积(0.2%),其他杂质峰面积的和(294nm)不得大于对照溶液主峰面积的2.5倍(0.5%),小于灵敏度溶液主峰面积的峰忽略不计干燥失重取本品,在105℃千燥至恒重,减失重量不得过0.5%(通则0831)炽灼残渣取本品1.0g,置铂坩埚中,依法检查(通则 0841),遗留残渣不得过0.2%重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣,依法检查(通则0821第二法),含重金属不得过百万分之十。细菌内毒素取本品,依法检查(通则1143),每1mg氧氟沙星中含内毒素的量应小于0.75EU。(供注射用)
