依托红霉素的鉴别检查方法
鉴别
(1)取本品约5mg,加丙酮2ml溶解后,加盐酸2ml,即显橙黄色,渐变为紫红色,再加三氯甲烷2ml振摇,三氯甲烷层显蓝色。(2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集36图)一致。
检查
酸碱度取本品0.40g,加水10ml,充分搅拌后,取上清液,依法测定(通则0631),pH值应为5.0~7.2游离红霉素照高效液相色谱法(通则0512)测定。临用新制。供试品溶液取本品适量,加乙腈溶解并定量稀释制成每1ml中含5mg的溶液对照品溶液取红霉素标准品适量,加乙腈溶解并定量稀释制成每1ml中含红霉素A0.15mg的溶液系统适用性溶液取依托红霉素与红霉素标准品各适量,加流动相溶解并稀释制成每1ml中各约含0.5mg的溶液。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸二氢钾溶液(称取磷酸二氢钾3.4g,加三乙胺2.75ml,再加水溶解并稀释至100oml)-乙腈(65:35),用稀盐酸调节pH值至3.0为流动相;柱温为30℃;检测波长为195nm;进样体积20系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,红霉素A峰与依托红霉素峰间的分离度应大于5.0测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图。限度按外标法以峰面积计算,游离红霉素不得过3.0残留溶剂照残留溶剂测定法(通则0861第一法)测定。供试品溶液取本品约50mg,精密称定,置顶空瓶中,精密加水5ml,摇匀,密封对照品溶液取丙酮适量,精密称定,加水定量稀释制成每1ml中约含0.05mg的溶液,精密量取5ml置顶空瓶中,密封色谱条件以6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷(或极性相近)为固定液的毛细管柱为色谱柱;柱温为50℃;检测器温度为250℃;进样口温度为140℃;顶空瓶平衡温度为90℃,平衡时间为30分钟。测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液分别顶空进样,记录色谱图。按外标法以峰面积计算。限度丙酮的残留量应符合规定。水分取本品,加10%咪唑无水甲醇溶液溶解后,照水分测定法(通则0832第一法1)测定,含水分不得过4.0%。
