生长抑素的检查及鉴别方法
鉴别
(1)照薄层色谱法(通则0502)试验。供试品溶液取本品适量,加水溶解并稀释制成每1ml中含1mg的溶液对照品溶液取生长抑素对照品适量,加水溶解并稀释制成每1ml中含1mg的溶液色谱条件采用硅胶G薄层板,以冰醋酸-吡啶-水-正丁醇(10:15:20:45)为展开剂测定法吸取供试品溶液与对照品溶液各101,分别点于同一薄层板上,展开,用热风吹干,喷以0.1%茚三酮乙醇溶液,在115℃加热约5分钟至斑点出现。结果判定供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液主斑点的位置和颜色相同(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
检查
氨基酸比值取本品,加6mol/L盐酸溶液,于110℃水解24小时后,照适宜的氨基酸分析方法测定。以门冬氨酸、丙氨酸、赖氨酸、甘氨酸和苯丙氨酸摩尔数总和的八分之一作为1,计算各氨基酸的相对比值,应符合以下规定:门冬氨酸0.90~1.10,甘氨酸0.90~1.10,丙氨酸0.90~1.10,苯丙氨酸2.7~3.3,丝氨酸0.7~1.05,苏氨酸1.4~2.1,半胱氨酸1.4~2.1,赖氨酸1.8~2.2。酸度取本品10mg,加水10ml溶解后,依法测定(通则0631),pH值应为4.5~6.5。吸光度取本品,精密称定,加0.9%氯化钠溶液溶解并定量稀释制成每1m中含0.05mg的溶液,照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定,在280nm的波长处的吸光度不得大醋酸取本品约15mg,精密称定,置10ml量瓶中,加稀释液[流动相A(通则0872)-甲醇(95:5)]溶解并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液,照合成多肽中的醋酸测定法(通则0872)测定,含醋酸应为3.0%~15.0%。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液取本品,加水溶解并稀释制成每1ml中含0.5mg的溶液对照溶液精密量取供试品溶液2ml,置100ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。系统适用性溶液取生长抑素对照品约10mg,置20ml量瓶中,加30%过氧化氢溶液1ml,放置1小时,加水稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸溶液(取磷酸11ml,加水800ml,用三乙胺调节pH值至2.3,用水稀释至1000m)为流动相A,以乙腈为流动相B;流速为每分钟1.5ml;检测波长为215nm;按下表进行梯度洗脱;进样体积50时间(分钟)流动相A(%流动相B(%)系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,理论板数按生长抑素峰计算不低于2000,生长抑素峰与其相对保留时间约为1.1的氧化降解物峰之间的分离度应不小于2.0测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(1.0%),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积(2.0%)。水分取本品,照水分测定法(通则0832第一法)测定含水分不得过8.0%。细菌内毒素取本品,依法检查(通则1143),每1mg生长抑素中含内毒素的量应小于30EU
