牛子宫内膜上皮细胞 BEND使用说明
细胞名称
牛子宫内膜上皮细胞 BEND
CELLBIO 货号
CBR-131460
动物种别
牛
细胞数量
1X10^6
培养瓶规格
25T
传代次数
2-3 代
稳定传代次数
10-15 代
传代方式
1：2 或 1：3 传代
推荐培养方案
90%Hyclone DMEM 高糖
培养基；10% Gibco 胎牛
血清、1%-1.5%Cellbio 双
抗
培养温度
37℃
二氧化碳浓度
5%
细胞纯度
≥99%
支原体检测
（-）
培养体系内毒素检测
≤0.5EU/ml
细胞处理注意事项
1、收到细胞，请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中
的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
2、收到细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清. 刚接到细胞，若细胞不多时 血清浓度可以加到 15％去培养。若细胞迏到 80%左右 ，血清浓度还是在 10％。
3、收到细胞时如无异常情况 ，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过 80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下 5-10ML 培养基继续培养：超过 80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液，1000 转/分钟离心 3 分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
4、24 小时后，细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加 3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS 或 Hanks’液洗涤后弃去。加
0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般 1-3 分钟，不超过 5 分钟。可以放入 37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入 3-5ml
培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后将溶液吸入离心管内离心 1000rpm/5min。
弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。
5、贴壁细胞 ，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液培养。
来源：上海一基实业有限公司
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