猪子宫内膜上皮细胞PEECs使用说明
细胞处理注意事项
1、收到细胞,请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中
的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,出现此状态时,请不要打开细胞培养瓶,应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止
3-5
小时左右,让细胞先稳定下,再于显微镜下观察,此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁,请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
2、收到细胞后,请镜下观察细胞,用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多,请离心收集细胞,接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液,使用新鲜配制的培养基,使用进口胎牛血清.
刚接到细胞,若细胞不多时 血清浓度可以加到 15%去培养。若细胞迏到 80%左右 ,血清浓度还是在 10%。
3、收到细胞时如无异常情况 ,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过 80%汇合度时,将培养瓶中培养基吸出,留下 5-10ML 培养基继续培养:超过 80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出
培养液,1000 转/分钟离心 3 分钟,吸出上清,管底细胞
用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
4、24 小时后,细胞形态已恢复并贴满瓶壁,即可传代。(贴壁细胞)将培养瓶里的培养基倒去,加 3-5ml(以能覆盖细胞生长面为准)PBS 或 Hanks’液洗涤后弃去。加
0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,消化时间以具体细胞为准,一般 1-3 分钟,不超过 5 分钟。可以放入 37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁,见细胞脱落下来,加入 3-5ml
培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后将溶液吸入离心管内离心 1000rpm/5min。
弃上清,视细胞数量决定分瓶数,一般一传二,如细胞量多可一传三,有些细胞不易传得过稀,有些生长较快的细胞则可以多传几瓶,以具体细胞和经验为准。(悬浮细胞)用移液管轻轻吹打瓶壁,直接将溶液吸入离心管离心即可。
5、贴壁细胞 ,悬浮细胞。严格无菌操作。换液时,换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液培养。
细胞名称 | 猪 子 宫 内 膜 上 皮 细 胞 |
PEECs | |
CELLBIO 货号 | CBR-131497 |
动物种别 | 猪 |
细胞数量 | 1X10^6 |
培养瓶规格 | 25T |
代数 | 2 代 |
稳定传代次数 | 15 代 |
传代方式 | 1:2 或 1:3 传代 |
推荐培养方案 | 90%DMEM 高糖培养基、 |
10%GIBCO 北美胎牛血清、 | |
1%-1.5%Cellbio 双抗 | |
培养温度 | 37℃ |
二氧化碳浓度 | 5% |
细胞纯度 | ≥99% |
支原体检测 | (-) |
培养体系内毒素检测 | ≤0.5EU/ml |