Oasis HLB 净化和 aCQUiTY UPLC/TQD 快速分析动物性食...（二）
结果与讨论
样品前处理条件的确定
糖皮质类激素属于一类脂溶性激素，在结构上都是环戊烷多氢菲衍生物。所以选择采用乙酸乙酯作为提取溶剂能够实现从动物组织中有效的提取此类药物。由于此类化合物具有较强的非极性，在 HLB 柱上有较强的非极性保留作用，所以实验采用低洗脱强度的甲醇 / 水溶解样品提取物转移上 HLB 柱，依次用水和 50% 甲醇水溶液洗除极性、中等极性的样品基质杂质，再用甲醇 / 乙腈混合溶剂把糖皮质类激素药物洗脱下来，而部分动物油脂等非极性杂质保留在 HLB 上，从而实现了糖皮质类激素的有效净化富集。
表 1. ACQUITY TQD MRM 参数。
色谱条件的优化
由于 9 种糖皮质类激素化合物极性上存在一定差异，所以采用梯度方法在乙腈 / 水的流动相体系下实现分离，结果见图 1 。其中泼尼松龙和可的松 (405.2 ﹥ 329.2 ， 405.2 ﹥ 359.2 ) ，倍他米松和地塞米松 (437.2 ﹥ 361.2 ， 437.2 ﹥ 391.2 ) 两组化合物的母离子和子离子完全一样，只是在结构上空间异构，在质谱上无法区分，所以必须通过色谱实现分离后定量定性分析，实验优化了梯度程序、色谱柱温及流速，使两组化合物实现了基线分离，从而能够准确定性和定量测定。
质谱条件的优化
在 ESI(-) 模式下，糖皮质类激素化合物形成 [M-H+HCOOH]- 形式的分子离子峰，通过碰撞处理，子离子扫描进一步得到定量和辅助定性子离子碎片峰，进而采用 MRM 模式进行监测， MRM 条件参见表 1 。实验分别对毛细管电压、锥孔电压、碰撞能量等参数进行了优化，使方法灵敏度和分辨率满足检测需要。
方法的线性范围、准确度和精密度
9 种糖皮质类激素混合标准品在 1 ng/mL ~ 100 ng/mL 浓度范围内进样分析，得到线性方程和相关系数。采用空白样品添加 10μg/kg 水平下，平行 6 次，计算添加回收率及 RSD ， 结果参见表 2 和图 2 。
图 2. 糖皮质类激素标准品、空白样品、添加样品总离子流 (TIC ) 色谱图。
表 2. 糖皮质类兴奋剂测定方法线性方程、相关系数、相对标准偏差和回收率。
结论
本文采用 HLB 净化和 UPLC/TQD 系统建立了快速有效的监测动物性食品中 9 种糖皮质类激素的全分析方案。 Oasis HLB 能够有效地对动物性样品进行净化和富集，除去油脂、蛋白等基质干扰，提高了方法灵敏度，降低了基质效应； UPLC/TQD 系统在 6.5 min 内实现了高效分离和快速测定，同时实现了准确定量和确证的目的。为奥运动物性食品中糖皮质类激素的监测提供了有力的技术支持和参考，也对其它类型食品的监测提供有意义的借鉴
参考文献
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项目成果
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企业风采
