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核酸扩增—连接酶链反应

2021.5.12

  LCR由基因扩增技术和连接酶方法结合而成,是继PCR之后的快速DNA扩增方法。与PCR不同的是,LCR采用2对寡核苷酸探针,每对寡核苷酸探针与变性正负靶链杂交时处于相邻的位置,两者之间形成一个缺口,只有当它们与靶DNA碱基配对且3'与5'端相邻位置均正确时,DNA连接酶才能将其连接起来。一旦2个探针相连接,连接产物可在下一轮循环中充当模板,通过变性与连接的重复循环,靶DNA链片段呈指数扩增。扩增后应用微粒子酶免疫技术(MEIA)对扩增产物进行测定,进一步提高了检测的敏感性和特异性。 LCR技术具有相当高的敏感性和特异性,其敏感性与PCR相同,由于LCR扩增的产物是正确退火并连接的寡核苷酸探针,所以其特异性高于PCR,且具有无创伤性采样、操作简单、分析时间短、无污染性、测定结果准确等特点。

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