使用CORTECS UPLC HILIC色谱柱进行饮用水分析（一）
Jeremy C. Shia、Masayo Yabu、Kim Van Tran和Michael S. Young
沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德)
应用优势
♦ 与现有HILIC方法相比，大大改善了百草枯和敌草快的保留性能和分离度。
♦ CORTECS™ UPLC® HILIC色谱柱可以在百草枯和敌草快之间实现基线分离，允许MS和UV检测使用相同的色谱参数。
沃特世解决方案
ACQUITY UPLC® H-Class 系统
ACQUITY® TQD 质谱仪
CORTECS UPLC HILIC 色谱柱
Oasis® WCX 小柱
关键词
敌草快，百草枯，UPLC/MS/MS，UPLC/UV，SPE，饮用水，HILIC，CORTECS
简介
敌草快和百草枯是带双电荷的季胺盐类除草剂(图1)。它们在世界范围内被广泛用于控制农作物和水生杂草。美国环保署(EPA)规定的饮用水中最高污染物水平(MCL)为20
µg/L (20 ppb)。百草枯被EPA列为限用农药。为了保证饮用水质量，欧盟(EU)委员会规定单一除草剂的下限为0.1 µg/L (100
ppt)1。2007年继瑞典当局裁定一项法案之后，欧盟也禁止再继续使用百草枯。敌草快和百草枯的极性都很强，难以在C18色谱柱上使用反相液相色谱法保留。大多数已发表的方法，包括美国EPA方法549.2，都需要往流动相中添加己烷磺酸钠盐等离子对试剂，才能在这两种季铵盐分析物中实现所需的保留时间和分离度。为了满足欧盟等国家和机构规定的极低的定量要求，质谱(MS)成为了必要的检测手段，然而离子对试剂的使用会对MS检测产生显著的离子抑制作用。作为一种替代技术，亲水性相互作用色谱(HILIC)与离子对色谱相比具有一定优势。由于无需添加离子对试剂，MS离子化效率得到提高。其次，提取液中有机溶剂含量通常很高，可以不经含有离子对试剂的水相流动相稀释直接进入色谱柱中。本应用纪要中演示了使用CORTECS
UPLC HILIC色谱柱进行UPLC分离能够显著改善两种分析物的保留时间和分离度，使得仅用UV一种检测方法就能实现最低500ppt的检测。
实验
样品描述
首先，将自来水用硫代硫酸钠进行脱氯处理。加入磷酸铵，将所有样品的pH值调整至7左右。然后，将样品加载到Oasis WCX小柱上。通过蒸发和浓缩减小SPE洗脱液的体积，实现样品富集。详细的SPE步骤如图2所示。
UPLC条件
系统： 配有光电二极管阵列(PDA)检 测器的ACQUITY UPLC H-Class系统
色谱柱： CORTECS UPLC HILIC 1.6 µm， 2.1 x 100 mm(部件号186007106)
流动相(等度)： 50:50 A/B
流动相A： 200 mM甲酸铵缓冲液，pH 3.7
流动相B： 乙腈
进样体积： 20 µL
柱温： 30 ℃
Wash溶剂：乙腈/水(50:50)
Purge溶剂：乙腈/水(50:50)
流速： 0.5 mL/min
PDA 检测条件： 敌草快为UV 308 nm，百草枯为UV 257 nm
样品瓶： 聚丙烯自动进样器样品瓶 (部件号186002642)
表1总结了本次研究中使用的MRM通道和LC/MS参数。
试剂
1. pH调节浓缓冲液(400mM磷酸盐缓冲液，pH 7)准确称量23 g磷酸二氢铵，加入500 mL容量瓶中。加入水 (Milli-Q或同等试剂)使之完全溶解，然后稀释至约400 mL。加入氢氧化铵溶液调节pH值至7.2。用水稀释至标线。
2. SPE活化和清洗溶液(10 mM pH 7磷酸盐缓冲液)取10 mL上述400 mM pH 7浓缩缓冲液，用水稀释至400mL。
3. SPE 洗脱液(10:90甲酸/乙腈)将50 mL甲酸加入450 mL乙腈中并充分混合。
