核酸染色实验——核仁组成区嗜银蛋白
| 实验方法原理 | 核仁组成区是 DNA 的襻，具有核糖体基因（rDNA），在一定条件下可用银反应法进行定位，是通过银的聚合物沉积于胱氨酸和半胱氨酸的双硫键位置上，所以在镜下能够清楚可见颗粒状的核仁组成区嗜银蛋白（AgNOR）。 |
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| 实验材料 | |
| 试剂、试剂盒 | |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | AgNOR 染色液： ①甲液：取明胶粉 2 g 溶于双蒸水中至 99 ml，宜在 60℃ 使之完全溶解，然后再加入纯甲酸 lml，摇匀待用。 ②乙液：取硝酸银 50 g 溶于双蒸水至 100 ml，充分溶解后保存于冰箱。 AgNOR 工作液：取甲液 10 ml，乙液 20 ml，置于立式染色缸中混合后即可使用，临用时配制。 1. 石蜡组织切片 3 Mm，常规脱蜡至水。 2. 双蒸馏水浸洗 2 次。 3. 在 AgNOR 工作液中（25℃）浸染 30 min 左右（暗处进行），25 min 后不断地在镜下观察。 4. 蒸馏水中浸洗 3 次。 5. 无水乙醇浸洗 2 次。 6. 二甲苯-石炭酸（4:1）混合液处理 1 min。 7. 二甲苯透明和中性树胶封固。 展开 |
| 注意事项 | 1. 室温低于 20℃ 以下时，可在隔水式恒温箱中进行染色，不断观察着色情况。 2. 染色时间不能太长，防止细小颗粒融合为较大颗粒或团块状，不易计数。 |
| 其他 | 结果：核仁组成区嗜银蛋白颗粒呈黑色，背景呈淡黄色。 |
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