蛋白质染色实验——银染法
实验材料 | |
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试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 将聚丙烯酰胺凝胶放在塑料容器并以5倍体积的固定液覆盖,在旋转摇床中缓慢摇动30 min 以上。
2. 倾去固定液,加5倍凝胶体积的脱色液,缓慢摇动60 min 以上。
3. 倾去脱色液,加5倍凝胶体积的10%戊二醛,在通风橱中缓慢摇动30 min。
4. 倾去戊二醛溶液,用水洗凝胶4次以上,每次30 min 以上,最后一次洗涤以过夜为佳。缓慢摇动。
5. 倾去水,将凝胶置于约5倍凝胶体积的硝酸银溶液中平衡(完全盖没凝胶),剧烈振荡 15 min。
6. 将凝胶移至另一塑料盒,用去离子水洗5次,每次精确5 min,缓慢摇动。
8. 换快速定影液,定影5 min,必要时,用湿润了的棉花擦去凝胶表面沉积的残余银沉积物。顿去定影液,用水彻底冲洗凝胶。 |
注意事项 | 1. 带手套并仅在通风橱中进行。 |
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