生物样品的前处理技术--物理法进行细胞破碎
物理法主要通过各种物理因素的作用使组织细胞破碎,常用的有以下一些方法。
①反复冻融法 把待破碎样品冷至20-15℃使之冻固,然后缓慢融化,如此反复操作,大部分动物细胞及细胞内的颗粒可被破碎。
②冷热交替法 在细菌或病毒中提取蛋白质和核酸时可使用此法。操作时,将材料放入沸水中,在90℃左右维持数分钟,立即置于冰浴中,使之迅速冷却,绝大部分细胞被破坏。
③超声波处理法 此法多用于微生物材料,处理效果与样品浓度及使用频率有关。用大肠杆菌制备各种酶时,常选用50～100mg/ml菌体,在1～10kMz频率下处理10～15min。
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