中空纤维膜过滤技术在病毒类疫苗中的应用（五）
3.2.2 实验结果
我们分别使用中空纤维 750k和500k超滤柱(GE)、300k和500k超滤膜包(分别来自于两家进口品牌) 进行流感病毒尿囊液的浓缩洗滤，考察处理速度、病毒 HA收率、总蛋白和浓缩液澄清度等指标。
使用中空纤维和膜包进行浓缩，均采用先浓缩后洗滤的策略，先浓缩20倍即开始滤洗5倍，然后继续浓缩至50x左右。这样可以避免高浓度卵清蛋白聚集，提高卵清蛋白的透过去除效率，提高产品质量。
3.2.3 分析讨论
我们比较了上述不同孔径的中空纤维膜和超滤膜包对流感病毒尿囊液的浓缩性能：
使用中空纤维膜和超滤膜包进行流感病毒尿囊液浓缩，除 500k膜包在透过端有HA血凝滴度检出外，其余三种膜均无漏过，HA收率令人满意。中空纤维750k 滤膜平均处理速度为 35LMH，比 300k膜包快60%以上。
中空纤维 750k和中空纤维 500k相比，750k 滤膜使用切向流速相对较低，可以在保证病毒稳定性的基础上，适当提高切向流速，进一步提高处理速度。
所得尿囊浓缩液中，单位血凝价的总蛋白(TP/HA)可以用于快速直观的表征浓缩液中的杂蛋白残留量。单位血凝价的总蛋白含量越低，说明浓缩过程的杂蛋白透过去除更彻底，所得浓缩液病毒相对纯度越高。由上表的数据可见，500k和 750k中空纤维进行浓缩，杂蛋白的含量均低于 300k 膜包，其中 500k中空纤维膜单位血凝价的总蛋白比 300k膜包低7%，750k中空纤维单位血凝价的总蛋白比 300k膜包低 1倍以上，中间产物质量显著得到改善。
将不同孔径中空纤维滤膜所得尿囊浓缩液外观进行比较 (如图6)：中空纤维750k颜色浅白，黏度低，卵清蛋白去除较为彻底；而500k中空纤维膜仍为浅黄色，去除效果稍差。相比传统 300k膜包而言，中空纤维显著改进了浓缩液中间产物质量，有利于减轻后期4FF层析纯化的负荷，保证整体工艺的可靠性。
在此基础上，我们下一步将使用中空纤维750k滤膜对不同型流感尿囊液的滤洗时机、滤洗缓冲液组成、切向流速和压力等参数进行深入优化，避免卵清蛋白聚集，进一步提高卵白去除效率。
