【求助】SDS-PAGE紧急求助

最新回复

• eric930 (2014-2-14 10:12:32)

  
  楼主为何怎么不用恒压跑呢?
  恒流是可以的，但是就是没有恒压稳定

• qianqin1977 (2014-2-14 10:12:56)

  QUOTE:

  原帖由 mybioon 于 2014-2-14 10:10 发表
  请问5%浓缩胶，12%分离胶可以一直用150V的电压跑吗？还是需要先小电压再换大些？谢谢！

  开始时电流为10 mA，待样品进入分离胶后，将电流调至20-30 mA.

• taoshengyijiu (2014-2-14 10:13:16)

  
  电流什么时候开始用v表示了？
  推荐先60-80v，再100-120v

• mybioon (2014-2-14 10:14:18)

  
  还是不大理解，就用150V不行吗？

• taoshengyijiu (2014-2-14 10:14:36)

  
  很多资料上都是建议先用小的电压然后再用大的电压，可能是小的电压有利于蛋白在浓缩胶中的浓缩，并在进入分离胶以后能有一个共同的起始点。但目前的多数实验不一定要这么精确
  一般用稳压，在电泳过程中会发现电流是逐渐变化的，而且是逐渐的变大，这样随之带来的问题就是整个电泳系统所产生的热量可能越来越多，所以为了控制热量的产生很多人会建议试用稳流，这样产生的热量比较的恒定
  对于大多数电泳而言，本身的要求就不是那么精确，目前的多数实验室的条件比较好，因电泳无法散热或者散热不好而出现的烧胶或者其他问题常常是出现在一些新手身上
  用稳压还是稳流很多时候都是一个实验室的习惯，而是否从前到后一直用一个电流还是电压，看实验要求看个人习惯
  你问的问题，要看你用的什么样的电泳槽，不同规格的电泳槽所能承受的电压是不一样的
  曾做过几百次电泳，只用一个电压，也未觉得有何不妥

• zhenxin (2014-2-14 10:15:00)

  们先用80V电压跑积层胶，大概15分钟到分离胶后用120V电压，至溴酚蓝跑到胶底部终止。

• caihong (2014-2-14 10:15:21)

  
  我们直接200V跑下来，没什么问题。

• taoshengyijiu (2014-2-14 10:15:38)

  我100v, 180v,都跑过，都问题不大，我们老板还让直接200v跑到底，她说没有问题，我们觉得电流太大太热了点