放射免疫法快速检测饲料中磺胺类药物(Sulfonamides，SAs)...
放射免疫法快速检测饲料中磺胺类药物(Sulfonamides，SAs)残留 -2
5、控制点的建立
（1）取多抗标准品直接加蒸馏水至10mL。
（2）按1：19加萃取缓冲液配制成阳性对照液(50微克/kg)。
（3）取6个阳性对照(50微克/kg)。按照分析程序运行。得出6个cpm值，计算其平均值。在平均值上加上平均值的15％即为饲料中磺胺类检测限100微克/kg的控制点。
二、结果与分析
（一）灵敏度验证实验
首先按1.3.5控制点的建立方法确定饲料中磺胺类检测限为100微克/kg的控制点epm值是1671。选取阴性饲料样品，添加多抗标准品，添加水平分别为50、100、120微克/kg，每个水平做lO份样品，测定出的epm值与控制点epm值1671进行比较。如样品的epm值大于1671，则结果为阴性；如样品的epm值小于1671，则结果为阳性，实验结果如表1。
| 添加水平（微克/kg） | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
| 0 | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - |
| 50 | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - |
| 100 | + | + | + | + | + | + | + | + | + | + |
| 120 | + | + | + | + | + | + | + | + | + | + |
注：“+ 代表阳性，“一 代表阴性。
从表1可知，添加水平为50微克/kg及空白对照样品结果均为阴性，而添加水平为100、120微克/kg的样品结果均为阳性。说明在检测限为 100微克/kg时此方法的灵敏度能满足检测要求。
（二）特异性验证实验
本实验室选取阴性饲料样品，分别加入13种磺胺类药物标准品（分别为SM2．SMJ、SQ SMM SM SDM SPD SIZ
SMZ、SD、SPP、SMP、SCP）及四环素、氯霉素、氨苄青霉素、卡那霉素标准品，添加水平为100微克/kg，测定加标后epm值，与控制点
epm值1671相比较，结果添加13种磺胺类标准品的样品测定结果阳性率为100％。而添加四环素、氯霉素、氨苄青霉素、卡那霉素等标准品的样品测定结果均为阴性。上述实验验证了Charm
II放射免疫分析法测定饲料中磺胺类残留的特异性能满足检测要求。
（三）卖测结果分析
应用Charm II放射免疫分析方法测定41份饲料样品的磺胺类残留，其中检测出5份样品初筛阳性，经GC-MS确认其中2份为阴性，检测的假阳性率为7-32％。取 1O份初筛阴性的样品，经GC-MS确认均为阴性，假阴性率为0％。
三、结论
应用Charm
II放射免疫分析方法测定饲料样品的磺胺类残留，该检测方法可靠，灵敏度高，特异性强，且快速简便，在60min内可出初筛结果，假阴性率为0％，特别有助于大批量样品的初筛检测。但是，由于该检测方法是基于微生物受体反应，检测结果有假阳性的可能，因此，初筛阳性的样品必须用其他方法确证。Charm
II放射免疫分析方法作为目前一种快捷可靠的检测手段，值得推广应用
