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无菌技术的要点来啦

2023.4.23

细胞培养中的无菌技术

无菌技术事细胞培养中,十分重要的一个环节。保持实验无菌性、防止污染对于保证细胞状态、维持实验结果的完整性和稳定性而言,都有着重要意义。污染会严重影响实验结果,危及整个实验的完整性。

什么是无菌技术

细胞实验过程中的污染,来源广泛,包括空气污染物、被污染的介质或试剂等。不正确的实验操作也会导致污染。因此,在细胞培养过程中,每个实验步骤中的“无菌技术”,就变得很有意义。

无菌技术是一套防止微生物(包括细菌、病毒、真菌、支原体等)污染生物样品或培养物的操作方法。这些技术一定程度上保证实验不受有害微生物的影响,以提高实验结果的质量。

无菌技术有哪些?

1、设备的清洁与灭菌

在开始任何细胞培养实验之前,必须对所有设备、耗材和试剂进行灭菌处理,当然,我们推荐实验人员尽量选择商品化的无菌试剂。

灭菌方法包括高压灭菌、过滤、紫外线照射、乙醇喷洒或擦拭、消毒清洁试剂喷洒或擦拭等。

2、环境的清洁与灭菌

所有细胞培养工作应在无菌和清洁的环境中进行。因此要对实验环境进行清洁与灭菌。

包括实验前对实验空间定期清洁,包括桌面、地面、墙面、生物安全柜操作台等,开始实验前,还应打开生物安全柜中的紫外线灯进行照射灭菌。

除了常规的消毒试剂,这里推荐使用德国Minerva Biolabs的Mycoplasma-off支原体祛除喷雾剂,不仅对支原体起作用,还能高效清除并预防细菌、真菌等污染物。

3、正确处理实验材料

正确处理实验材料,实验操作应符合相关规定、避免交叉污染。包括佩戴适当的个人防护设备,如手套、口罩;及时更换移液器一次性器具等操作。

4、实验室合理布局

在实验过程中,严格遵守实验室中物品摆放准则,以培养箱举例:培养皿摆放密度应合理,宜少不宜多等。

5、定期监测培养物

定期监测培养物,对于及早发现和解决而言,也是一个关键点。这包括在显微镜下检查培养物状态、肉眼观察培养基的形态、颜色等变化等。必要时可以使用PCR技术定期测试微生物污染的存在。

德国Minerva Biolabs Venor® Gem Classic支原体检测试剂盒,用于常规实验中支原体的检测;如果需要进行项目申报等流程,需要严格的方法学验证,可以使用德国Minerva Biolabs Venor® Gem qEP,支原体qPCR检测试剂盒,通过《欧洲药典》和《日本药典》的方法学验证,方便快捷、准确率高。

总结

总之,在细胞培养过程中保持无菌条件是保证实验结果准确可靠的必要条件。遵循适无菌技术,定期监测培养,并采取必要的预防措施来防止污染,可以显著降低细胞培养中生物污染的风险。


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