两例2q37缺失综合征临床及基因芯片分析
2q37缺失综合征是由于2号染色体长臂3区7带片段缺失引起，患者常发生以智力及生长发育障碍、骨骼畸形、外观及行为异常为主的一系列症状，因此也称为BDMR综合征或AHO-like综合征。由于此类综合征临床表现多样，用常规的细胞遗传学检验技术较难检测到基因组微小缺失，在临床上常易漏检。
单核苷酸多态芯片(array single nucleotide polymor-phism，array-SNP)技术是一种全新的分子核型分析技术，具有高分辨率、高通量、高敏感性和高准确性等优点，近年来，被逐步应用于不明原因的发育迟缓、多发畸形、非明显综合征及临床怀疑染色体病患儿的检测。本研究应用array-SNP芯片对2例生长发育迟缓、智力低下患儿进行病因诊断，结果报告如下。
临床资料
病例1，男，3岁，因“智力发育落后3年”就诊。有典型孤独症表现：无自主语言，有多音节不自主发音，呼名不理人，无互动娱乐，感情交流差，交往缺陷，有特殊兴趣（鸡毛、盖子），喜前庭刺激游戏。母否认孕期有特殊情况，患儿新生儿期有黄疸病史，家族有类似疾病史（4个表兄弟姐妹有相似表现，其中一表姐临床诊断孤独症，均未行染色体核型或基因芯片检测）。查体：身高88 cm(-2.3 SD)，体重13 kg，营养中等，无特殊面容，体态无异常。实验室检查：(1)血常规未见异常；(2)肝肾功能、心肌酶、血脂、电解质、血糖正常；(3)甲状腺功能正常；(4)血串联质谱：未见异常；(5)染色体：46，XY；(6)智力测试：Gesell检查：适应性10月龄(m)29分，大运动16 m 45分，精细动作10.7 m30分，语言9 m 25分，个人-社会13 m 30分；中度智力发育障碍；(7) Chat孤独症筛查量表：孤独症高风险；(8)头颅MRI未见异常。
病例2，女，1个月，因“体重不增”就诊。生后喂养闲难，纳奶量少，无呕吐。足月顺产出生，Apgar评分1 min、5 min均为10分，出生体重2.17 kg，身长50 cm，系足月低出生体重小于胎龄儿，生后1 d因皮肤黄染住院予光疗退黄治疗。查体：体重2.7 kg，神清，反应可，发育落后，营养差。皮下脂肪菲薄。尖脸，耳位低，四肢肌张力正常。实验室检查：(1)血常规：白细胞7.4x109/L(中性粒细胞0.257，淋巴细胞0.627)，血红蛋白136 g/L，血小板246x109/L；(2)肝肾功能、心肌酶、血脂、电解质，血糖正常；(3)甲功五项：TT3 1.43 nmol/L，TT4 91.18 nmol/L，TSH 10.21 mU/L，FT3 2.38 pmol/L，FT4 12.30 pmol/L；(4)血串联质谱：未见异常；(5)腹部B超：肝胆胰脾未见明显异常；(6)头颅B超：未见异常；(7)染色体：46XX。
提取2例患儿外周血DNA，用Human CytoSNP-12 bead chip kits（美国Il-lumina公司）芯片，该芯片有约30万个检测位点。按试剂盒说明书操作。结果提示：(1)病例1检测到2q37.1~2q37.3区存在7.70 Mb的杂合性缺失：缺失序列信息chr2：235，325，669~243，029，573，包含从ARL4C基因到CXXC11基因的基因组片段（见图1）。(2)病例2检测到2q37.2~2q37.3区存在7.35 Mb的杂合性缺失，缺失序列信息为chr2：235，677，678~243，029，573，包含从SH3BP4基因到CXXC11基因的基因组片段（见图2）。
多重连接探针扩增技术(MLPA)应用端粒检测试剂盒SALSA MLPA P264( MRC-Holland)，探针杂交、连接反应及探针扩增均参照试剂盒说明进行，扩增产物经ABI-3130基因分析仪进行毛细管电泳后生成MLPA图谱。Coffalyser-NET软件(MRC-Holland)对图谱进行分析。结果提示：两例病例的检测结果均为2q37.3的杂合缺失（见图3、4）。
讨论
2q37区域是已知最为常见的染色体末端缺失区域之一，该区域可进一步细分为2q37.1、2q37.2和2q37.3。由于缺失范围不相同，临床表现可多种多样。目前关于2q37缺失综合征的报道国外有100余例，国内报道有2例，主要临床特征为面部畸形、短指/趾、行为异常（孤独症或自闭症）、超重或肥胖、癫痫、身材矮小等，其中骨骼畸形是一个显著特征。
本研究病例1为3岁幼儿，主要表现为智力语言发育迟缓，行为异常（孤独症表现），身材矮小，无面部及短指/趾骨骼畸形，符合2q37缺失综合征的临床表现。病例2为婴幼儿，年龄1个月，主要表现为生长迟缓，体重不增，面部异常（尖脸，耳位低），指趾外观未见异常。通过高分辨率array- SNP分析，两例患儿均发现2q37末端缺失，综合分析，考虑该缺失是其共同的致病原因，2例病患常规染色体核型分析均未能发现异常。病例2由于年龄过小，是否进一步出现其他该综合征相关表现需要继续随访观察。
虽然2q37缺失综合征的临床特征具有一定可辨识性，但明确诊断仍然需要分子细胞遗传学。随着技术的发展，array-SNP技术已经逐步应用于多种疾病的临床诊断和研究，它能够检测染色体微小缺失或重复发生的位置、片段大小以及涉及的基因。Hochstenbach等通过文献总结，发现在智力低下及生长发育迟缓患者中，若以微阵列技术作为首选检测方法，检出率可达19%，是传统细胞遗传学方法的2倍。研究显示，有智力障碍、畸形、发育障碍等提示染色体病的症状，但核型分析为正常或平衡易位的患者，应用基因芯片分析其异常检出率为10%~ 50%。2010年美国临床遗传学会也明确指出，多发畸形和（或）不明原因智力落后、非已知的综合征及孤独症等应首选染色体芯片分析技术检测，而不再是传统的染色体核型分析。
本研究应用array-SNP分析，明确2例患儿染色体2q缺失的断裂位点、片段大小及基因序列。2例患儿缺失片段有重叠，重叠区域为2q37.2至2q37.3，此外，病例1缺失范围较大，同时包含了2q37.1区域，非重叠缺失区域片段大小为352010 bp，涉及的基因为ARLAC，其与表型关系目前尚不明确，有待进一步研究。2q37区域至少包含197个基因，国外针对临床诊断2q37缺失综合征的病例进行遗传学及临床表型研究发现，该区域与2q37综合征有关的基因有11个，但各自与表型的关系尚不明确。这些候选基因中，HDAC4是较为明确的与短指/趾及智障相关的基因，而其他候选基因与该综合征各临床特征的关系、其发病机制等有待进一步研究探索。
