概述氢氯噻嗪的有关物质检查
一、酸碱度
取该品0.5g，加水25mL，振摇2分钟，滤过，取续滤液10mL，加0.01mol/L氢氧化钠溶液0.2mL和甲基红指示液0.15mL，溶液应显黄色。再加0.01mol/L盐酸溶液0.4mL，溶液应呈红色。
二、有关物质
取该品约15mg，加等体积混合的甲醇和乙腈溶液2.5mL使溶解，用0.02mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.2）稀释至10mL，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液适量，加溶剂溶液〔取等体积混合的甲醇和乙腈50mL加0.02mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.2）至200mL〕稀释制成每1mL中含7.5μg的溶液，作为对照溶液。另取氢氯噻嗪和氯噻嗪对照品各约15mg，用甲醇和乙腈等体积的混合溶液25mL溶解，再用0.02mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.2)稀释至100mL，摇匀，精密量取此溶液5mL，用溶剂溶液稀释至100mL，作为系统适用性试验溶液。照高效液相色谱法（附录V D）测定。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为：0.02mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.2) -甲醇-四氢呋喃（940∶60∶10），流动相B为：甲醇-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.2) -四氢呋喃（500∶500∶50）；流速为每分钟1.0mL，线性梯度洗脱；检测波长为224nm。氢氯噻嗪和氯噻嗪峰的分离度应大于2.5。
取对照溶液10mL注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰的峰高约为满量程的20%～25%。精密量取溶剂溶液、供试品溶液与对照溶液各10mL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积（0.5%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍（1.0%）。小于对照溶液主峰面积0.1倍（0.05%）的峰可不计。
甲醇、乙醇取异丙醇适量，精密称定，用水制成每1mL约含0.2mg的溶液，作为内标溶液。取该品约0.25g，精密称定，置20mL顶空瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺2mL，振摇使溶解，精密加入内标溶液1mL，再加水至10mL，加盖密闭，振摇使溶解，作为样品溶液。分别称取甲醇、乙醇适量，精密称定，用水制成每1mL含甲醇、乙醇分别约为0.15mg、0.25mg的溶液。精密量取5mL，置20mL顶空瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺2mL，精密加入内标溶液1mL，再加水至10mL，加盖密闭，作为对照品溶液。照残留溶剂测定法（附录Ⅷ P）试验，以内涂6%氰丙基和94%甲基聚硅氧烷色谱柱（30m×0.32mm，1.0μm）开口毛细管柱色谱柱为色谱柱，柱温采用程序升温：初始温度为40℃，保持8分钟后，以每分钟45℃升至200℃，保持3分钟。检测器为FID，温度为250℃；进样口温度为200℃；载气为氮气，流速为每分钟2mL。顶空进样，顶空瓶平衡温度为80℃，平衡时间为30分钟，进样体积为1.0mL。分别取对照品溶液与供试品溶液的顶空气进样测试，记录色谱图，以内标法按峰面积计算，含甲醇、乙醇应符合规定。
