药品中一般杂质检测方法--溶液颜色检查法
本法系将药物溶液的颜色与规定的标准比色液比较,或在规定的波长处测定其吸光度。品种项下规定的“无色”系指供试品溶液的颜色相同于水或所用溶剂,“几乎无色”系指供试品溶液的颜色不深于相应色调0.5号标准比色液。
1.目视比色法
除另有规定外,取各品种项下规定量的供试品,加水溶解,置25ml纳氏比色管中,加水稀释至10ml,另取规定色调和色号的标准比色液10ml,置于另一25ml纳氏比色管中,两管同置白色背景上,自上向下透视,或同置白色背景前平视观察,供试品管呈现的颜色与对照管的颜色比较,不得更深。如供试管呈现的颜色与对照管的颜色深浅非常接近或色调不完全一致,使目视观察无法辨别两者的深浅时,应改用第三法(色差计法)测定,并将其测定结果作为判定依据。
药典规定用重铬酸钾液(每1ml含0.800mg的K2Cr2O7)为黄色原液,硫酸铜液(每1ml含62.4mg的CuSO4·5H2O)为蓝色原液,氯化钴液(每1ml中含59.5mg CoCl12·6H2O)为红色原液。
分别取不同比例的以上三种比色液与水,配成深黄色、黄绿色、黄色橙黄色、橙红色和棕红色六种色调的标准贮备液。并按规定量取各种色调标准储备液,加水稀释至10ml,即得黄绿色、黄色、橙黄色、橙红色和红色的1~10号的标准比色液。
检查时根据药物有色杂质的颜色以及对其限量要求,选择相应颜色一定色号的标准比色液作为对照液,进行比较。如注射用对氨基水杨酸钠溶液颜色的检查方法:取供试品一瓶,加水溶解制成每1ml含0.2g的溶液,与黄色6号标准比色液比较,不得更深。
2.分光光度法
用分光光度法检查有色杂质,通过测定溶液的吸收度而更能反映溶液的颜色变化。除另有规定外,取各供试品项下规定量的供试品,加水溶解并使成10ml,必要时滤过,滤液照紫外-可见分光光度法于规定波长处测定,吸光度不得超过规定值。
如维生素C易受外界条件影响而变色,规定取本品3.0g,加水15ml,振摇使溶解,溶液经4号垂熔玻璃漏斗滤过,滤液于420nm波长处测定吸收度,不得过0.03。
3.色差计法
本法是通过色差计直接测定溶液的色差值,对其颜色进行定量表述和分析的方法。当目视比色法较难判定供试品与标准比色液之间的差异时,应考虑采用本法进行测定与判断。
供试品与标准比色液之间的颜色差异,可以通过分别比较供试品与水之间的色差值来得到,也可以通过直接比较它们之间的色差值来得到。
测定时除另有规定外,用水对仪器进行校准。取按各品种项下规定的方法制得的供试品溶液和标准比色液,置仪器上进行测定,供试品溶液与水的色差值△E*应不超过相应色调的标准比色液与水的色差值△E0*。
也可以将预先测定好的各色调色号的标准比色液对水的标准色差值△E0*输入到仪器,然后直接测量供试品溶液对水的色差值△E*;若△E*值小于等于△E0*,供试品溶液颜色合格,反之为不合格。
