脂肪的测定方法--罗兹法
1、原理:
(1)在牛奶中加入氨水(浓氨水)破坏牛奶中蛋白质的胶体性质,使乳中酪蛋白钙盐生成可溶性的氨盐。
(2)加入95%乙醇使乳中脂类与非脂类分离。
(3)加入乙醚抽取脂类。
(4)加入石油醚除去乙醚中包容的水分。
(5)到出醚层,挥发除去乙醚、石油醚;剩下的脂肪即为牛奶中的脂肪。
2、检测步骤:
(1)用电子天平精确称取10g均匀牛奶样(奶粉1克用9毫升蒸馏水溶解分次洗)于毛氏抽脂瓶中。
(2)加入2ml浓氨水,充分混匀。
(3)加入10ml95%乙醇,加入2滴刚果红,充分混匀。
(4)加入25ml乙醚,振摇1分钟,100次/1分钟,振摇过程中要放气1~2次,用混合液洗瓶塞。
(5)加入25ml石油醚,振摇半分钟,振摇过程中放气1~2次,用混合液洗瓶塞后静置半小时。
(6)小心地将静置后的醚层倒入三角瓶(洗净、烘干1.5小时后,天平室内无尘,自然冷却1小时,称重m1)中,并用混合试剂洗瓶颈。
(7)再向毛氏抽脂瓶中加入5ml乙醇,充分摇匀。
(8)加入15ml乙醚,振摇100次/1分钟,用混合试剂洗瓶塞。加入15ml石油醚振摇半分钟,用混合试剂洗瓶塞,静置半小时。
(9)将静置后的醚层再倒入三角瓶中,并用混合试剂洗瓶颈。
(10)将两次抽提的醚液(在三角瓶内),于30~60℃,水浴锅中,在通风橱里挥发除去乙醚、石油醚。
(11)将剩有脂肪的三角瓶放98~100℃烘箱中烘1.5小时,至恒重,取出在天平室内无尘自然冷却1小时后称重m2.
3、计算:
m2-m1
脂肪含量%=───────×100
M
式中:m2——脂肪和空三角瓶重(g)
m1——空三角瓶重(g)
M——称取牛奶质量(g)
FT120测定(略)
苏丹三鉴定法
(1)把材料用切片机切成1mm的小薄片,并移至洁净的载玻片上
(2)用滴管滴加2~3滴苏丹三染液,染色2~3min后用吸水纸吸去染液并滴加1~2滴50%的酒精洗去浮色再吸去酒精
(3)滴加1~2滴蒸馏水后盖上盖玻片在显微镜下观察
(4)橘黄色的小颗粒即为脂肪
应用于脂肪测定的新技术:超微滤袋技术
由于滤袋技术(Filter Bag Technology,FBT)用于批量分析饲料中的纤维含量的推广,使ANKOM Technology闻名于世。早在1993年ANKOM纤维分析仪就已经被世界各地广泛应用于准确测定酸性洗涤纤维(Acid Detergent Fiber, ADF),中性洗涤纤维(Neutral Detergent Fiber, NDF)和粗纤维(Crude Fiber, CF)。基于在纤维分析方面已获得的经验,ANKOM Technology新近又开发了一项快速批抽提脂肪技术(Accelerated Batch Extraction, ABE)。ANKOM脂肪分析仪是采用ANKOM技术开发的一项使用普通溶剂快速抽提食品和饲料脂肪的新技术而研制成的。