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分子克隆-蛋白表达实验指南(十六)

2020.7.27

Amp(50mg/ml)
        溶解1g
Amp于足量的水中,最后定容至20ml。分装成小份于-20℃贮存。常以20~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基,1:1000比例稀释
      
      Kan(50mg/ml)
        溶解1g
Kan于足量的水中,最后定容至20ml。分装成小份于-20℃贮存。常以20~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基,1:1000比例稀释
  
      EB
  100ml蒸馏水中加1g EB,磁力搅拌数小时,以确保完全融解。然后用铝箔包裹容器或将容器转移至棕色瓶中,室温保存
  
  TAE(50×)
  Tris base             242g
      冰醋酸              57.1ml
      EDTA               0.05mol
      调PH至8.5,定容至1L
  
  考马斯亮蓝R-250染色液
  乙醇                  135ml
  水                    135ml
  冰醋酸                30ml
  考马斯亮蓝R-250粉末  0.75g
        过滤除去颗粒,乙酸过滤后加入
  
      溶菌酶(10mg/ml)
        每克溶菌酶溶于100ml 10mM,PH=8.0,灭菌的TrisCl中,4C store
  
      DTT(1M)
        用20ml 0.01M乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,过滤除菌后分装成小份,储存于-20C
  
  dNTPs
  100mM初浓度,按照每种20ul量加,最后定容至800ul。终浓度为每种dNTP 2.5mM
  
  PMSF(50mM)
  溶解87mg的PMSF(苯甲基磺酰氟)于足量的异丙醇中,定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹,-20C保存。
     
  20% Triton-100
  20ml 100% Triton-100溶于80ml PBS或TBS中,水浴搅拌融化。使用时加至所需终浓度
  
  5% X-Gal
  溶解50mg的X-Gal于1ml的DMF或DMSO中, 用铝箔包裹装液管,贮存于-20℃。每次配1ml,分装。否则放在-20C X-Gal最多保存4个月
  
  Glutathione Elution Buffer
     10 mM reduced glutathione in 50 mM Tris-HCl (pH 8.0). Dispense in 1-10 ml
  aliquots and store at -20°C until needed. Avoid more that five freeze/thaw
  cycles.
  (配40ml 20mM的:0.242Tris base到40ml ddwater中,PH8.0,再加glu0.246g。)

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