阿卡波糖的鉴别和检查方法
鉴别
(1)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。(2)本品的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致(通则
检查
酸碱度取本品,加水溶解并制成每1m中含20mg的溶液,依法测定(通则0631),pH值应为5.5~7.5。吸光度取本品,加水溶解并稀释制成每1ml中约含50mg的溶液,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在425nm的波长处测定吸光度,不得过0.15。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量,加水溶解并稀释制成每1ml中约含20mg的溶液对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置100m量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀系统适用性溶液取阿卡波糖约0.2g,置10m量瓶中,加少量水使溶解,加0.1mol/L氢氧化钠溶液1ml,混匀,放置1小时,加0.1mol/L盐酸溶液1ml中和,用水稀释至刻度,摇匀灵敏度溶液精密量取对照溶液适量,用水定量稀释制成每1ml中约含10μg的溶液。色谱条件用氨基键合硅胶为填充剂( Welch ultimateBNH2色谱柱,4,6mm×250mm,5m或效能相当的色谱柱);以磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾0.6g与无水磷酸氢二钠0.279g,加水溶解并稀释至1000ml)-乙腈(25:75)为流动相;流速为每分钟2.0ml;检测波长为210nm;柱温35℃;进样体积10l系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,杂质Ⅳ峰、杂质Ⅱ峰、杂质I峰与杂质Ⅲ峰的相对保留时间分别为0.50.8、0.9和1.2。杂质I的峰高(Hp,从基线至杂质I峰的最高点)与杂质Ⅰ和阿卡波糖两峰之间的峰谷(Hⅴ,从基线至两峰之间的最低点)之比(Hp/H)不得低于2.0,理论板数按阿卡波糖峰计算不低于2000。灵敏度溶液色谱图中,阿卡波糖峰高的信噪比应大于10测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的2.5倍限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,杂质Ⅳ峰面积乘以0.75、杂质Ⅱ峰面积乘以0.63、杂质I峰面积与杂质Ⅲ峰面积分别不得大于对照溶液主峰面积的1倍(1.0%)、0.5倍(0.5%)、0.6倍(0.6%)与1.5倍(1.5%);其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.2倍(0.2%);校正后总峰面积不得大于对照溶液主峰面积的3倍(3.0%)。小于灵敏度溶液主峰面积的杂质峰忽略不计。水分取本品,照水分测定法(通则0832第一法1)测定含水分不得过4.0%。炽灼残渣取本品1.0g,依法测定(通则0841),遗留残渣不得过0.2%重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣,依法检查(通则0821第二法),含重金属不得过百万分之二十。
