质谱快速鉴定两例AIDS合并真菌性血流感染病例分析-2
1. 4 真菌小培养 将马铃薯葡萄糖琼脂培养基切割 成小块置于载玻片上,用接种环挑取纯培养的丝状真 菌接种于培养基的四角,盖上盖玻片, 28 ℃培养2~ 3 d后用乳酸棉兰酚染色,于高倍镜下观察真菌形态。
注: A表示血培养直接涂片革兰染色镜检结果( 10×100); B表示 35 ℃孵育48 h菌落形态; C表示28 ℃孵育48 h菌落形态; D表示真菌 小培养乳酸棉兰酚染色镜检结果( 10×40)。 图3 病例2血培养阳性涂片结果及纯培养菌落 特点与镜下结果
2 结 果
2. 1 质谱鉴定结果 2例患者均在入院后送检血培 养,在血培养报阳后直接用质谱仪进行检测。病例1 鉴定结果为新型隐球菌,质谱评分为2. 142。病例2 鉴定结果为青霉菌属某些种,质谱评分为1. 474。见 图1。
2. 2 传统鉴定结果 病例1:患者血培养双侧需氧瓶 分别于67、 70 h报警阳性,涂片革兰染色镜检找到正 圆形的芽生孢子。将标本接种在血琼脂平板、巧克力 琼脂平板及沙保弱培养基上, 35 ℃ 48 h培养均长出 白色光滑酵母样菌落。经API 20 C板条鉴定为新型 隐球菌。见图2。病例2:患者血培养双侧需氧瓶分别于77、 89 h 报警阳性,涂片革兰染色找到丰富的菌 丝及少量真菌孢子,孢子两头钝圆、中间有隔的腊肠 形。将标本接种在血琼脂平板、巧克力琼脂平板及沙 保弱培养基上,分别于28 ℃和35 ℃孵育48 h,血平 板上可见灰白色腊样、膜状平坦菌落,菌落中央可见 脐状凹陷; 35 ℃培养的沙保弱斜面上可见白色酵母 样菌落,不产生红色色素。28 ℃培养的沙保弱斜面上 可见淡红色绒毛状菌落,整个培养基被染成玫瑰红 色。真菌小培养后可见分枝分隔菌丝,分生孢子梗光 滑,呈帚状枝分散,多为对称双轮生;梗基上有3~6 个瓶梗,顶端变窄。通过培养的双相性以及帚状枝形 态可鉴定为马尔尼菲蓝状菌。见图2、 3。
2. 3 最终诊断结果 病例1患者经神经内科会诊后 考虑脑血管意外及 HIV脑病,经市传染病医院会诊 后考虑AIDS,中枢神经系统感染,隐球菌脑炎。予甘 露醇脱水,伏立康唑静滴抗真菌及纠正电解质紊乱等 治疗,并转至市传染病医院进行进一步治疗,目前患 者情况稳定,恢复良好。病例2患者淋巴结活检示锁 骨上淋巴组织增生,中性粒细胞灶性浸润,小脓肿形 成伴多量组织细胞反应,倾向感染性变化。请市传染 病医院会诊考虑AIDS,并转至市传染病医院进行进 一步治疗。
注: A表示血培养直接涂片革兰染色镜检结果( 10×100); B表示 35 ℃孵育48 h菌落形态; C表示28 ℃孵育48 h菌落形态; D表示真菌 小培养乳酸棉兰酚染色镜检结果( 10×40)。 图3 病例2血培养阳性涂片结果及纯培养菌落 特点与镜下结果
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