血液及骨髓培养分离马耳他布鲁氏菌病例分析
布鲁氏菌感染引起的布鲁氏菌病为急性或慢性传染病，属人畜共患疾病。该病临床表现变化多端，细菌培养时间长、检出率低，给该疾病的诊疗带来一定困难，极易延误诊疗。本院收治不明原因发热患者1名，分别经血液、骨髓培养分离出马尔他布鲁氏菌，确诊为布鲁氏菌病，本文对此病例进行总结分析。
病历资料
患者女性，37岁，无明显诱因出现畏寒、发热，体温最高38.8℃，同时伴有头痛、头晕，镇卫生院以“感冒”治疗两周无效，体温控制不理想，仍有间断性下午畏寒、发热，体温最高39.3℃ ，持续3～4 h左右，至次日晨起恢复正常。随后至县中医院门诊给予5剂中药汤剂治疗，体温仍控制不理想，遂以“不明原因发热”来本院就诊治疗。否认既往草原居住史，但有牛、羊接触史。
结果
实验室检查：血细胞计数无明显异常，ESR：90 mm/h，ALT：82 U/L，AST：87 U/L，GGT： 114 U/L，ALP：162U/L，ADA：40 U/L，LDH：389 U/L，α-HBDH：296 U/L，GRP：27.6 mg/L，铁蛋白：562 ng/mL。虎红平板试验：阳性。同时采集患者血液和骨髓进行培养，培养70 h，需氧培养瓶、厌氧培养瓶均阳性报警，移种血平板和中国蓝平板35℃、5％ CO2培养箱培养，同时涂片染色，镜检并未发现细菌，查看生长曲线无几何升高。24 h后血平板和中国蓝均无明显菌落生长，继续孵育至48 h可见无溶血、圆形、光滑、极为细小菌落，涂片革兰染色为革兰阴性着色弱的微小球杆菌，氧化酶（＋），触酶（＋），VITEK 2 Compact革兰阴性鉴定卡上机鉴定，血液培养、骨髓培养分离菌得出结果均为马耳他布鲁氏菌，鉴定过程分别经过18.25 h 和8 h，生物编码为0000001300001000、00000013000012000，鉴定率分别为99％和95％ ，随即报告临床，结合血清凝集实验结果给予“头孢曲松钠联合多西环素联合利福喷丁”治疗，用药2 d后，体温控制正常，1周后停用“头孢曲松钠”，继续“多西环素联合利福喷丁”治疗6周后停药，随访6月，患者未再出现发热及周身不适，达临床治愈。
讨论
布鲁氏菌是胞内寄生病原菌，布鲁氏菌侵入人体后，即被吞噬细胞吞噬，随淋巴液到达局部淋巴结，当病菌增殖到一定数量后，冲破淋巴结屏障进入血液循环，出现菌血症、毒血症，且在肝、脾、骨髓等网状内皮系统中形成新的感染灶，其中的病原菌又可多次进入血液循环而导致复发，呈现波状热型。由于临床表现为反复发热、关节疼痛、全身乏力，易与上呼吸道感染、结核菌感染、风湿病、骨髓瘤、伤寒等疾病混淆，容易造成误诊。临床医师对长期发热伴呼吸、神经、血液系统疾病症状的患者，若常规治疗无效，应详细追问病史，并积极行布鲁氏菌血清学检测及血液、骨髓、体液培养，如分离到布鲁氏菌可确诊为布鲁氏菌病。
布鲁氏菌病在国内，羊为主要传染源，其次为牛和猪，布鲁氏菌有较高的感染率，由于乳品生产行业近年发展势头迅猛，牲畜交易场所检疫制度尚未完善，诱导布鲁氏菌病传染源程度不等的输入，增加了畜间感染率，进而对人类构成侵犯；畜牧企业缺乏建全管理制度，消毒畜舍产房的措施未加强落实，未无害化处理牲畜粪便等；健康促进和健康教育工作投入力度较弱，未加强职业人群中的个人防护；非职业引发的患者因未注意饮食，有较差的自我保护意识，进而诱导布氏菌感染。布鲁氏菌对人有极强致病力，常导致实验室获得性感染，被认为是潜在的生物恐怖病原菌。因此，在与此相关的实验室工作，要提高生物安全防护级别，所有标本处理应在生物安全2级以上实验室中处理，并在生物安全柜内进行。
对本文所述病例，在培养过程中发现报警阳性但增菌液涂片却未发现细菌，培养生长曲线也与其他血培养阳性生长曲线有所不同。有研究表明当血液病患者白细胞较高时，可能因培养产生大量CO2导致假阳性报警，而该例患者白细胞计数正常，故认为假阳性的可能不高，遂及时联系临床医师，并结合血清凝集试验结果，在移种平板24 h后未发现菌落生长时，延长移种平板的孵育时间才发现有细小菌落生长，最终分离出致病菌，鉴定为马耳他布鲁氏菌。所以对于阳性报警，应高度重视，及时与临床医师沟通了解患者病情，调整检验诊断的思路，防止漏诊、误诊，延误患者治疗。
