药物疾病治疗的研究思路：由表及里，由浅到深（二）
既然槲皮素可以抑制PASMCs增殖，增强其凋亡，那么，槲皮素的抗增值活性怎么样呢？BrdU免疫检测显示，槲皮素可显著减少由于缺氧引起的DNA合成增加。此外，AnnexinV-FITC分析表明随着剂量的增加，细胞凋亡增强。Western
blot检测表明凋亡调控蛋白Bax和Bcl-2在槲皮素处理后显著缓解由于缺氧引起的表达变化。因此，槲皮素可显著增强
PASMCs细胞在缺氧条件下的抗增殖和凋亡过程。缺氧诱导的PAH最重要的发展过程之一是PASMC的迁移。通过Transwell系统分析显示槲皮素可以有效抑制由于缺氧引起的PASMCs的迁移增加，且表现出明显的剂量效应。迁移相关蛋白检测表明MMP-9，MMP2，CXCR4，integrin
β1和integrin α5的表达减少可以被槲皮素缓解。因此，槲皮素在抑制缺氧下PASMC的迁移起着重要的调控作用。
三槲皮素治疗PAH的生物学机制是什么？
上述的研究对于槲皮素治疗PAH的机理可以说已经非常清楚了。在缺氧诱导的PAH中，槲皮素通过调控PASMC细胞的增殖，细胞周期，凋亡和迁移过程而起到治疗效果。那么，内在的生物学机制是什么呢？是哪些基因，或者通路调控而表现出这些现象？研究人员在上海伯豪运用Agilent Whole Rat Genome array进行了全基因组差异基因筛选。GO
pathway分析显示，缺氧组相比正常组的差异基因主要集中在细胞过程，结构发育，生物过程调控，器官发育等过程。而在用槲皮素治疗后，下调基因主要集中在生物过程反馈，细胞过程调控，胁迫反应等过程。同时，对比正常组，缺氧组和缺氧药物处理组的34个差异基因主要是一些与凋亡，增殖，细胞周期和迁移相关基因。芯片的结果也显示TrkA通路的基因表达发生了显著的变化，特别在槲皮素处理后发生了明显的下调。因此，在槲皮素治疗缺氧引起的PAH过程中，TrkA通路是其重要的调控通路。
为了进一步研究槲皮素对TraK信号通路的调控能力，研究人员对TrkA及AKT的磷酸化水平进行了检测。结果显示，具有活性的p-TrkA水平在缺氧时显著增加，p-AKTde显著减少，而在槲皮素处理后这种变化会被显著抑制。当有TrkA激活子NGF处理时，可以部分抵消掉槲皮素处理引起的缓解作用。因此，槲皮素可能是通过抑制PASMCs细胞中的TrkA/AKT信号通路而影响缺氧造成的肺动脉高压。
点评
该研究通过大鼠缺氧诱导肺动脉高压模型，从槲皮素是否能治疗肺动脉高压？怎么起作用的？内在的调控机制是什么？三个问题出发，由表及里，由浅到深，为槲皮素可能用于肺动脉的治疗提供了宝贵的资料。
原文出处：
He Y, Cao X, Liu X , Li X, Xu, Liu J, Shi J. Quercetin reverses experimental pulmonary arterial hypertension by modulating the TrkA pathway. Exp Cell Res.2015
