涎腺乳腺样分泌性癌病例临床病理学特征分析-1
涎腺乳腺样分泌性癌（mammary analogue secretory carcinoma，MASC）是近年来新发现的涎腺肿瘤，比较少见，2010年由Skalova等首次提出，因其特征与乳腺分泌性癌相似而得名，并收录于2017版《WHO头颈部肿瘤病理学和遗传学分类》。MASC组织学形态易于发生于涎腺的其它低度恶性或高分化肿瘤混淆，特别是缺乏酶原颗粒的腺泡细胞癌，因此掌握其诊断及鉴别诊断至关重要。至今，国内有关MASC的报道较少。本文报道4例资料完整的MASC，从其病理形态、免疫表型及分子遗传学特征方面进行阐述，并复习相关文献，以提高对该肿瘤的认识，减少诊断失误。
1.资料与方法
1.1一般资料
收集4例南京医科大学第一附属医院病理科2018年7月至12月诊断为MASC的病例资料，其中1例为外院会诊（淮安市第一人民医院）病例。所有病例告知患者知情同意，并通过电子病历系统调阅临床病史，同时复习患者存档的病理切片，最终病理诊断由2位高年资病理医师复核确诊。
1.2苏木素-伊红染色
所有标本经10%中性福尔马林固定，常规脱水，石蜡包埋，4μm厚切片。切片脱蜡至水，苏木精（hematoxylin）、0.5%伊红（eosin）染色，脱水透明，晾干，中性树胶封片，光镜观察。
1.3免疫组织化学染色
免疫组织化学染色采用EnVision二步法。所用一抗细胞角蛋白（cytokeratin，CK）7、S-100、乳腺球蛋白、DOG-1、SOX-10、GATA结合蛋白3（GATA3）、肌上皮标记P63、α平滑肌肌动蛋白（α smooth muscle actin，α-SMA）、类肌钙蛋白（Calponin）、增殖细胞相关核抗原Ki-67等均购自福州迈新生物技术开发有限公司。
石蜡切片脱蜡至水后，3%H2O2抑制内源性过氧化物酶15min，PBS洗3min3次；根据相应抗体要求，修复组织抗原（柠檬酸缓冲液95～100℃10min或胰蛋白酶消化10min），PBS洗3min3次；抗体室温孵育1h或4℃过夜，PBS做阴性对照，PBS洗3min3次；多聚酶标二抗室温孵育15min，PBS洗3min3次；DAB显色3min，脱水透明，封片。
1.4荧光原位杂交
ETV6-NTRK3融合基因探针购自广州安必平医药科技股份有限公司。石蜡切片70℃烘烤10min，二甲苯浸泡脱蜡后冲水，100℃水煮20min，胃蛋白酶工作液消化，置于2×柠檬酸钠缓冲液（saline sodium citrate，SSC）溶液中漂洗5min2次，梯度乙醇脱水，自然晾干。滴加足量的探针与反应液混合物于组织片上的杂交区域，加盖玻片后用橡皮胶封边，置于湿盒中，80℃变性10min，37℃杂交过夜。2×SSC溶液中漂洗5min3次，置于70%乙醇后自然晾干。滴加DAPI复染剂于组织杂交区域复染细胞核，盖上盖玻片，置于暗室中，使用OLYMPUS-BX51荧光显微镜观察，Imstar全自动荧光原位杂交扫描分析软件拍照、分析图像。
