色谱法检测维生素类药物及其制剂含量
维生素B6又名盐酸吡哆醇,药典二部规定用高效液相色谱法测定维生素B6及其制剂的含量。维生素E含量测定方法很多,目前,各国药典多采用气相色谱法,该法简便、快速、专属性。药典收载的维生素E及其制剂均采用气相色谱法测定含量。
1.维生素B6的含量测定方法照高效液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以0.04%戊烷磺酸钠溶液(用冰醋酸调节pH至3.0)-甲醇(85:15)为流动相,检测波长为291nm。理论板数按维生素B6峰计算不低于4000。
测定法取本品,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液,精密量取10μl注入液相色谱仪,记录色谱图,另取维生素B6对照品,同法测定。
按外标法以峰面积计算,即得,按干燥品计算,含C8H11NO3·HCl应为98.0%~102.0%。维生素B6的含量按式计算。
As为供试品的峰面积;Ar为对照品的峰面积;Ds为供试品溶液的稀释倍数;Dr为对照品溶液的稀释倍数;ms为供试品的称样量;mr为对照品的称样量;Vr为
对照品溶液的定容体积;Vs为供试品溶液的定容体积。
2.维生素E的含量测定方法 由于气相色法操作简便、快速、专展性强,所以
目前药典收载的维生素E及其制剂均采用气相色谱法测定含量。
色谱条件与系统活用性试验:用硅酮(OV-17)为固定相,涂布浓度为2%的填充柱,或用100%二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱,柱温为265℃。理论板数按维生素E峰计算不低于500(填充柱)或5000(毛细管柱),维生素E峰与内标物质峰的分离度应符合要求。
校正因子的测定:取正三十二烷适量,加正己烷溶解并稀释成每1ml中含10mg的溶液,作为内标溶液。另取维生素E对照品的20mg,精密称定,置棕色具塞瓶中,特密加内标溶液10ml,密塞,振摇使溶解,取1-3μl注入气相色谱谐仪,按式
计算校正因子。
式中,AS为内标物质的峰面积;Ar为对照品的峰面积;Cs为内标溶液的浓度;Cr对照品溶液的浓度。
测定法:取本品约20mg,精密称定,置棕色具塞瓶中,精密加内标溶液10ml,密塞,振摇使溶解,取1-3μl注入气相色谱仪,测定,计算,即得。本品含 C31H52O3应为 96.0%～102.0%。
