药物中蒽醌类化合物的检测方案（液相色谱）
液相色谱仪检测牛黄上清丸中4种蒽醌类化合物的含量
牛黄上清丸，中成药名。为清热剂，具有清热泻火，散风止痛之功效。用于热毒内盛、风火上攻所致的头痛眩晕、目赤耳鸣、咽喉肿痛、口舌生疮、牙龈肿痛、大便燥结。由人工牛黄、薄荷、菊花、荆芥穗、白芷、川芎、栀子、黄连、黄柏、黄芩、大黄、连翘、赤芍、当归、地黄、桔梗、甘草、石膏、冰片等组成。其中大黄主要含蒽醌、二蒽酮类及其衍生物，蒽醌类具有止血、抗菌、泻下、利尿的作用，能刺激肠道神经丛，促进肠蠕动。但是蒽醌成分具有肝毒性和肾毒性,还有一定的致癌作用。
本实验采用液相色谱仪检测牛黄上清丸中4种蒽醌类化合物的含量
仪器介绍
LC-600A智能全控液相色谱仪（南京科捷分析仪器有限公司）由P600高压恒流泵与UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用WS600工作站可以同时控制数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等，具备多元高压洗脱、波长扫描等功能；广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等众多分析领域。
（1）往复式并联泵设计，流量精度高，压力脉动小，延长密封圈和活塞杆的使用寿命；
（2）隔膜式脉冲阻尼器与电子脉动抑制技术同时控制压力脉动保障zui低的基线噪音；
（3）整体性单向阀，结构简单，密封性好；
（4）柱塞杆自动缩进，方便更换密封圈；
（5）可选配柱后清洗功能，适用于使用含缓冲盐的分析条件。
（6）平行双锥孔设计的流动池，大幅提高信噪比，检测效果更佳；
（7）开机自检功能，通过图谱上486.6nm和656nm这二点的位置，以判断波长示值误差的准确性，保证极优的波长精度，保障仪器zui佳状态；
（8）控制电路采用多微处理器结构，分别管理信号采集、数据处理，系统控制和通信。在做等度分析时，可以方便地通过全汉字的液晶屏与七个功能键，设置波长、滤波常数、输出量程，运行时间等参数。并且可以实现开关氘灯，光谱扫描，启动分析程序等功能；
（9）全数字交换系统，避免了色谱信号需要多重摸-数转换带来的信号畸变与干扰。
样品处理：
准确称取1.0g试样，置于100mL具塞提取瓶中，加入25mL甲醇，于超声波发生器中提取2h。将提取液经0.45μm滤膜过滤后，转移至液相色谱进样小瓶中，作为待测样品。
色谱条件：
色谱柱 | Kromasil C18柱150mm×4.6mm，5μm |
流动相 | 甲醇：0.5%磷酸=75%：25% |
流速 | 1.0mL/min |
柱温 | 30℃ |
检测波长 | 230nm |
进样量 | 10μL |
色谱图示：
牛黄上清丸中4种蒽醌类化合物的液相色谱图
1.大黄酸；2.大黄素；3.大黄酚；4.大黄素甲醚
