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100×Denhardt试剂(Denhardt’s regent) 配制方法

2020.7.21

100×Denhardt试剂(Denhardt’s regent)

成分及终浓度

配制100ml溶液各成分的用量

2%聚蔗糖(Ficoll,400型)
2%聚乙烯吡咯烷酮(PVP-40)
2%BSA(组分V)

2g
2g
2g
加水至总体积为100ml

依照上表称取各组分,溶于水中定容。过滤除菌及杂质,分装成小份于-20℃贮存。

10×标准DNA连接酶缓冲液(standard DNA ligase buffer)(粘端、平端连接)

成分及终浓度

配制10ml溶液各成分的用量

0.5mol/L Tris-HCl
100mmol/L MgCl2
100mmol/L DTT
2mmol/L ATP
5mmol/L 盐酸亚精胺(可选)
0.5mg/ml BSA(组分V)(可选)

5ml 1mol/L 贮液
1ml 1mol/L 贮液
1ml 1mol/L 贮液
200ul 100 mmol/L 贮液
50ul 1 mmol/L 贮液
0.5ml 10 mg/mL 贮液
2.25ml

将配制好的缓冲液分装成小份,贮存于-20℃ 。


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